三种检测乙型肝炎病毒方法相关性探讨.docVIP

　　三种检测乙型肝炎病毒方法相关性探讨 【关键词】 ,乙型肝炎病毒 　　［关键词］ 乙型肝炎病毒；酶免法(ELISA)；放免法(RIA)；多聚酶链反应法(PCR) 　　［摘 要］ 目的：通过对乙型肝炎病毒检测酶免法、放免法、多聚酶链反应法三者的相互比较，提示三者的相关性。 方法 ：血清标本分别采用酶免法、放免法、多聚酶链反应法进行检测。结果：酶免法两对半大三阳的模式中，HBVDNA定量阳性率为91．67％，放免法乙肝八项检查相符率88．89％；两对半小三阳的模式中，HBVDNA定性阳性率为40.00％，放免法乙肝八项检查相符率86．96％；两对半1．5阳性的模式中，HBVDNA定性阳性率为83.33％，放免法乙肝八项检查相符率11.11％。结论：乙型肝炎病毒检测法酶免法、多聚酶链反应法、放免法三者密切相关，后两者更能完善和补充酶免法的不足。 随着医学事业的迅猛 发展 ，医学检测技术也在不断提高，以满足临床大夫的需求，检测方法由生物分子学向更精细的基因延伸，乙型肝炎病毒的检测不典型示范局限以往的酶免法两对半，先后出现了放免法(乙肝八项)，多聚酶链反应法(乙肝PCR)等检测方法，为临床大夫的诊断、疗效观察、疾病预后提供准确的依据。现将乙型肝炎病毒检测的此三种方法的相关性加以比较。 　　1 材料与方法 　　1．1 标本来源 　　乙型肝炎病毒阳性血清标本96例，标本均系2004年9月至2004年12月新生体检乙肝两对半呈阳性者(其中包括大三阳，小三阳，1．5阳)。 　　1．2 试剂和仪器 　　乙肝两对半(酶免法)试剂由上海科华实业 科技 有限公司提供。乙肝八项(放免法)试剂由潍坊3V公司提供，仪器为FJ2008r计数器。乙肝PCR(HBVDNA)试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供，仪器为ABI5700荧光定量PCR仪。 　　1．3 方法 　　乙肝两对半(酶免法)由西北在学 医院 检验科专业人员严格按操作规程和试剂盒说明书进行。乙肝八项(放免法)和HBVDNA由 交通 大学医院核检测中心的专业人员严格按操作规程和试剂盒说明书进行。 　　2 结果 　　96例乙肝两对半阳性血清中多聚酶链反应法HBVDNA定量或定性和乙肝八项的检测结果比较见表1。表1 乙肝两对半和乙肝八项检测结果乙肝两对半（略） 注：大三阳为HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性；小三阳为HBsAg,HbeAb和HBsAb阳性;1．5阳HBsAg和HBcAb阳性。 　　3 讨论 　　从表1中可以看出：对乙肝两对半大三阳39例中36例作了HBVDNA定量检查，其中HBVDNAgt;103拷贝／ml 33例，阳性百分率91．67％。同时对大三阳39例中18例作了乙肝八项检查，其中16例为大三阳，相符率为88．89％。即乙型肝炎病毒两对半大三阳者HBVDNA定量几乎全部gt;103拷贝／ml，乙肝八项(RLA)相符率88．89％，反映ELISA、PCR、RIA三者高度相关，反映病毒复制活跃、传染性强，应引起大夫和患者的高度重视。对两对半小三阳45例中35例作了HBVDNA定性检查，其中HBVDNA定性阳性14例，阳性百分率40.00％。同时对小三阳45例中23例作了乙肝八项检查，其中20例仍为小三阳，相符率86．96％，即乙型肝炎病毒两对半小三阳HBVDNA定性阳性率低，反映一部分人病毒复制趋于停止，传染性弱，但仍有40％患者具有传染性，不能掉以轻心。对乙肝两对半1．5阳12例中6例作了HBVDNA定性检查，其中HBVDNA阳性5例，阳性百分率83.33％；对1．5阳12例中9例作了乙肝八项检查，其中1例仍为1．5阳，相符率为11.11％，即乙型肝炎病毒1．5阳性者HBVDNA定性阳性率较高，反映1．5阳性者一部分患者仍有传染性，病毒仍在复制，仍然需要 治疗 。总之，以上结果表明乙肝病毒检测法酶免法、PCR法、放免法三者高度相关，在乙肝病毒血清学诊断方面具有较高的一致性、互补性。 　　病毒性肝炎传统的检测法酶免法“两对半”仅仅只能定性，即阴性或阳性，无法观察病人在治疗过程中的疗效情况，而放免法“乙肝八项”实际是一种半定量的实验 方法 ，它可以从阳性数字的下降反映治疗的有效性。聚合酶链反应法(PCR)是模拟DNA复制反应，能快速、准确地从少量、特异性的指标，直接反应HBV复制状态及传染性情况，对HBV感染的诊断和疗效观察具有重要的意义。 　　表1中两对半大三阳模式中，HBVDNA定量有3例lt;103拷贝／ml，笔者认为有以下可能性存在：乙肝病毒发生了变异;病人在药物治疗中，药物抑制了病毒的复制;标本溶血， 影响 病毒复制；病毒复制量达不到阳性测定线。 　　观察表中两对半三种模式中HBVDNA定量和定性的百分率，可以看出不仅乙肝大三阳具有极强传染性和复制活跃，而且部