不同浓度骨髓基质细胞修复大鼠牙周组织缺损的实验研究.docVIP

　　不同浓度骨髓基质细胞修复大鼠牙周组织缺损的实验研究 作者：李艳芬 赵欣 闫福华 骆凯 郭建斌 江俊 【摘要】 　　目的 探讨不同浓度骨髓基质细胞（BMSCs）对牙周组织再生的影响。方法 将BMSCs以不同浓度（5×105，5×106，5×107mL-1）与胶原膜BME10X复合培养后，复合物和空白胶原膜BME10X分别植入SD大鼠牙周缺损部位，并覆盖膨体聚四氟乙烯膜（ePTFE膜），以缺损处只覆盖ePTFE膜为对照组，4周后取材，HE染色观察牙周组织再生情况。结果 各实验组新生牙槽骨面积与对照组相比有明显增加（P＜0.05），5×106，5×107 mL-1组的新生牙槽骨量与5×105 mL-1和空白BME10X组比较，差别有统计学意义（P＜0.05），而5×106，5×107，5×105mL-1与空白BME10X组组间比较则无统计学意义（P＞0.05）；各组新生牙骨质面积之间差别无统计学意义（Pgt;0.05）。结论 BMSCs浓度可影响其体内成骨能力，高浓度BMSCs能有效促进牙周组织再生。 【关键词】 组织工程； 引导组织再生，牙周； 牙周组织； 骨髓细胞； 胶原； 疾病模型，动物 　　ABSTRACT: Objective To evaluate the effects of bone marroal cells (BMSCs) embranes L-1, 5×10 mL-1, and 5×107 mL-1). The plex and collagen membranes ly implanted into the periodontal defects in Sprague Daembranes. The defects embrane alone served as a control. Periodontal regeneration etric measurements ed alveolar bone ental groups (P＜0.05). The area of need alveolar bone of the 5×106 mL-1 and 5×107 mL-1 groups L-1 and blank groups, ation L-1 and 5×107 mL-1 groups, the 5×105 mL-1 and blank groups. There ed cementum. Conclusion BMSCs ote the periodontal tissue regeneration. 　　KEY SCs）移植可显著促进牙周组织再生［13］，但其有效接种浓度尚未完全明确。本研究将不同浓度BMSCs与胶原膜BME10X复合，植入SD大鼠牙周缺损处，通过组织学观察和测量，探讨细胞接种密度对牙周组织再生的影响。 　　 1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 动物及分组 　　清洁级2～3月龄的雄性SD大鼠30只，体质量280～300 g，由上海斯莱克实验动物中心提供［许可证号：SCXX（沪）20070005］。随机抽取25只，每只双侧下颌第一、二磨牙颊侧分别制备牙周缺损区作为实验区域，共50个缺损区，完全随机法分为5组。A组：ePTFE膜组；B组：空白BME组+ePTFE膜；C组：5×105 mL-1组+ePTFE膜；D组：5×106 mL-1组+ePTFE膜；E组：5×107 mL-1组+ePTFE膜。C，D，E组分别用不同浓度的SD大鼠BMSCs与BME10X胶原膜复合培养后植入缺损部位。A组为空白对照组，B，C组为低浓度组，D，E组为高浓度组。 　　1.1.2 主要材料 　　DMEM低糖培养基（美国Gibco公司）；胎牛血清（美国Hyclone公司）；医用组织引导再生胶原膜BME10X（福建省博特生物科技有限公司）；膨体聚四氟乙烯膜（ePTFE膜，上海市塑料研究所）；瞬康医用胶（北京瞬康科技发展有限公司）。 　　1.2 方法 　　1.2.1 SD大鼠BMSCs的分离培养 　　采用 　 　3 讨论 　　牙周组织再生的基础是牙周韧带细胞（periodontal ligment cells, PDLCs），PDLCs是牙周 治疗 后形成牙周新附着的主要细胞来源，但在牙周病损部位其来源有限，限制了PDLCs作为种子细胞的临床应用，因此有必要寻找一种创伤小或无创伤即可得到的、繁殖能力强的、具有多向分化潜能的细胞用于修复牙周组织缺损。BMSCs来源丰富、取材方便，易于体外培养扩增，定向分化能力强，是组织工程研究中理想的种子细胞。 Kramer等将BMSCs与牙周韧带共同培养7～21 d，免疫组织化学和原位杂交结果表明