大豆蛋白提取和与含量测定.pptVIP

大豆蛋白的提取及与含量测定 一、目的要求 1.学习掌握离心机、752N、天平的使用方法和注意事项； 2.学习掌握大豆蛋白的提取及制备丙酮干粉的原理和方法； 3 .学习计算蛋白质收率,测定蛋白质含量 二、实验原理（一） 1.大豆蛋白的等电点为4.5-5.0是酸性蛋白，尽管大豆中含有水溶蛋白、盐溶蛋白、碱溶蛋白和醇溶蛋白，但其主要成分为碱溶蛋白，本实验为节省丙酮用量只进行碱提； 2.丙酮（有机溶剂）可降低溶液的介电常数、破坏蛋白质的水化膜，故可使蛋白质在一定条件下沉淀析出；调节蛋白质溶液的pH值到等电点附近，有利于蛋白质的沉淀。 三、试剂、材料及仪器 1. 0.2%的NaOH； 2. 6mol/L的HCl； 3. 1mol/L的HCl 4. 化学纯级丙酮 5. 市售大豆粉 6. 精密pH 试纸 7. 天平 8. 离心机（普通） 9. 离心内、外套管 10.烧杯 11.搅拌棒 四、实验步骤 提取：.称取3克大豆粉，用0.2%NaOH 30毫升。（先加入调成糊状，再用少量多次地慢慢地加入（边加边搅拌） NaOH溶液），室温下搅拌抽提15min，于6000r/min离心7min ,小心留取上清液，弃脂层和沉淀，如上清液有漂浮物，再经过滤； 留出上清液2毫升稀释50