中药半枝莲对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究.docVIP

　　中药半枝莲对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究 【摘要】 　　目的探讨不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法观察不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结果不同剂量半枝莲与对照组比较，具有显著性差异（Plt;0.05）；半枝莲与顺铂（DDP）合用组与单用DDP组比较，有显著性差异（Plt;0.05）。结论半枝莲能有效地抑制H22肿瘤生长，并能显著加强化疗药DDP的抑瘤效果。 【关键词】 半枝莲 H22 抑瘤 　　中药半枝莲(Herba Scutellariae Barbatae)为唇形科(Labiatae)植物半枝莲Scutellaria barbata D.Don的干燥全草。半枝莲性味辛、苦、寒，归肺、肝、肾经，是中医处方和成药中的常用中药，具有清热解毒、化淤利尿的功效［1］。近代药 理学 研究表明半枝莲抗肿瘤、抗病原、抑菌、解热、保肝等活性。半枝莲作为一种常用的抗肿瘤中药，在临床上应用多年，对肝癌、肺癌、胃癌、直肠癌、鼻咽癌等均有一定的疗效。本实验观察了不同剂量半枝莲提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响，以及生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标，来探讨半枝莲的抗肿瘤作用机制，以期为半枝莲抗肿瘤新药的开发和研制提供依据。 　　 1 材料与仪器 　　1.1 药材半枝莲Herba Scutellariae Barbatae购自济南市建联中药店，并由山东中医药大学药学院生药系石俊英教授鉴定为唇形科(Labiatae)植物半枝莲Scutellaria barbata D.Don的干燥全草。 　　1.2 动物及瘤株昆明种小鼠，雄性，体重（20±2）g，由山东大学实验动物中心提供。 　　H22肝癌小鼠购自山东省医学 科学 院药物研究所。 　　1.3 仪器与试剂超净工作台（北京半导体设备厂）；FA2004型 电子 天平（上海天平仪器厂）；蒸气消毒器（山东新华医疗器械厂）；注射用顺铂（DDP，批规格20 mg/支）(齐鲁制药有限公司)。 　　 2 方法与结果［2，3］ 　　2.1 半枝莲水提取物的制备 称取半枝莲200 g，加相当于药材量的5～7倍的水浸泡1～2 h，煮沸30 min，过滤，药渣加3～5倍药材量的水继续煎煮，煮沸30 min，过滤，合并滤液，于水浴上浓缩成每毫升相当于原生药材1 g的浓度，即得半枝莲水提取物。 　　2.2 H22肝癌肿瘤细胞悬液的制备 取传代后14 d的H22肝癌小鼠，脱颈椎处死，固定于鼠板上，依次用碘酊、酒精消毒操作部位皮肤，置于超净工作台中，无菌条件下，剥取肿瘤，选择生长良好无坏死及液化的肿瘤组织，剔除纤维包膜，在无菌表面皿中剪碎，置组织研磨器中，加入少量4℃生理盐水轻轻研磨，制成肿瘤细胞悬液，调整细胞浓度为1×107/ml。 　　2.3 昆明种小鼠移植H22肉瘤模型的制作 取体重20 g左右的昆明种小鼠，每鼠0.2 ml接种于右前肢腋窝皮下（肿瘤细胞数约为2×106个），24 h后称重，随机分成6组，分组情况为：对照组，顺铂组，半枝莲大、中、小3个剂量组，顺铂+半枝莲中剂量组。以上共分两大组，其中一组观察存活期以 计算 平均生存率,另一组计算瘤体重及其他相关指标。 　　2.4 给药与记录观察指标 各组给药情况如下：对照组：移植肿瘤后，每日灌服0.4 ml生理盐水；DDP组：按2.0 mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2 ml/只/次，共两次；半枝莲小剂量组：每天按10 g/kg体重灌服1次，连续10 d；半枝莲中剂量组：每天按20 g/kg体重灌服1次，连续10 d；半枝莲大剂量组：每天按40 g/kg体重灌服1次，连续10 d；DDP+半枝莲中剂量组：除每天按20 g/kg体重灌服半枝莲中剂量1次，连续10 d外；按2.0 mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2 ml/只/次，共两次。 　　给药10 d后停止给药，停药次日处死小鼠，称取小鼠体重，解剖瘤体、肝、肺、脾、胸腺，分别称重，出现提早死亡的动物则提前解剖称重纪录。计算抑瘤率、生命延长率、肝/体比、脾/体比、肺/体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标。抑瘤率＝（C－T）/C×100％ 。 　　T为实验组平均瘤重，C为对照组平均瘤重。结果见表1～4。 　　表1 不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠抑瘤率的影响（略） 　　与荷瘤对照组比较，△△P＜0.01；与DDP组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10 　　 3 讨论 　　本实验通过建立H22荷瘤小鼠动物模型，观察了抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及