130312第四章紫外-可见分光光度法范例.ppt

第四章 紫外-可见分光光度法(Ultraviolet-Visible Spectrophotometry, 简称UV-VIS) 第一节 分子吸收光谱 第二节 紫外可见吸收光谱 第三节 基本原理 第四节紫外-可见光光度计 第五节 定性与定量分析 第一节 分子吸收光谱 光谱 物质的颜色与光的关系 2.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁 能级跃迁 讨论： 讨论： 第二节 紫外可见吸收光谱 ?⑴　σ→σ＊跃迁 ? ⑶ π→π＊跃迁 ? 生色团与助色团 ? 红移与蓝移 （二）金属配合物的紫外—可见吸收光谱 电荷转移吸收光谱 光源 检测器 2、标准对照法 （二）多组分的定量分析法 (1)图计算法----两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） (3) 图计算法----两组分吸收光谱完全重叠--混合样品测定 2. 等吸收双波长法 The end! 一、主要部件 1.光源： 2.单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件 钨灯或卤钨灯 氢灯或氘灯 —可见光源 350~1000nm —紫外光源 200~360nm 色散元件 棱镜 光栅 对不同波长的光折射率不同 衍射和干涉,不同波长的投射方向不同 玻璃棱镜:适用于可见区 石英棱镜:适用于紫外区 高度抛光的玻璃上刻有等宽、等距平行条痕 狭缝：进出光狭缝。 准直镜：复合光→平行光→色散后→聚集狭缝 最佳宽度:减小狭缝宽度而溶液吸光度不变。 3.吸收池：比色皿、比色杯，装样品溶液。有玻璃、石英杯两种 4.检测器：光→电，光电池(硒,硅)，光电管(红,紫)，光电倍增管。 5.信号处理显示器：放大较弱的电信号，并在检流计上显示出来。 氘灯—紫外 卤钨灯--可见 单色器光路图 吸收池 光 比色槽 比色杯 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管、光电倍增管或光二极管阵列。 二、光学性能 1.波长范围： 2.波长准确度：一般误差为±0.5nm —可见光 400~1000nm —紫外-可见光 190~360nm 3.波长重现性：波长准确度的1/2左右。 4.狭缝和谱带宽：单色光纯度指标。最小谱带宽度可达0.1~0.5nm 5. 分辨率：数值越小越好。中等仪器≤0.5nm,高级仪器≤0.1nm 6.杂散光：所含杂散光强度百分比作指标。中等仪器≤0.5%, 高级仪器≤0.001% 7.透光率测量范围：中档仪器为0%~150% 8.吸光度测量范围：中档仪器为-0.1730~+2.00 9.测光准确度：中档仪器误差为 ±0.5% 10.测光重现性：测光准确度误差范围的1/2左右。 三、分析条件的选择 （一） 测量条件的选择 1.吸光度的范围： T ∈ 20%~65%，A∈0.2～0.7之间 吸收最大的波长为入射光，干扰最小 （二）显色反应条件的选择 显色反应：将试样组分转变成有较强吸收的有色化合物的反应。 显色剂：与被测组分化合生成有色物质的试剂。 1. 显色反应的条件： (1) 定量反应、选择性要好； 干扰少。 (2) 灵敏度要高，摩尔吸光系数ε大。 (3) 有色化合物的组成要恒定，化学性质要稳定。 (4) 有色化合物与显色剂的最大吸收波长之差≥60nm。 (5) 显色反应的条件要易于控制。 2.测定波长的选择： M 十 R ＝ MR（被测物）（显色剂）（有色配合物） 2. 溶液酸度 3. 显色温度及 显色时间 T1(℃) T2(℃) t(min) A 用量通过实验来确定 只能用于定性 1. 显色剂用量： （三）参比溶液（空白溶液）的选择 用于调节100%T，若选择不适当，对测量读数的影响较大。主要是消除溶液中其他组分对光的吸收等带来的影响。 1. 溶剂参比液 当试液、试剂、显色剂均无色时，用溶剂(通常是蒸馏水)作参比液； 3. 试剂参比液 如果显色剂或其他试剂略有吸收，可用不含待测组分的试剂溶液作参比溶液。 2. 试样参比液 如果试样中的其他组分也有吸收， 但不与显色剂反应，则当显色剂无吸收时，可用试样溶液作参比溶液。 4. 平等操作参比液 用不含待测组分的溶液，在相同条件下与待测试样同时进行处理，此为平行操作参比溶液。 第五节 定性与定量分析 紫外-可见分光光度法主要用于有机物分析。 定性分析：比较吸收光谱特征可以对纯物质进行鉴定及杂质检查； 定量分析：利用光吸收定律进行分析 （一）定性鉴别： 一、 定性分析 对比法：比较样品化合物的吸收光谱特征与标准化合物的吸收光谱特征；或与