5-氨基水杨酸经Nur77调控肺血管内皮细胞重构.pdfVIP

上海交通大学医学院硕士论文 5-氨基水杨酸经Nur77 调控肺血管内皮细胞重构 摘 要 第一部分 5-氨基水杨酸改善MCT 诱导的 肺动脉高压大鼠的血流动力学 目的：探讨 5-氨基水杨酸对野百合碱 （MCT ）诱导的大鼠肺动脉高压的干预作 用。 方法： Sprague Dawley (SD) 雄性大鼠共60只，随机分为6组，每组10只，分别 为：正常对照组 （Control组）、肺动脉高压组 （PAH组）和5-氨基水杨酸不同剂 量治疗组(5ASA-50组，5ASA-100组，5ASA-150组，5ASA-200组) 。PAH组、5- 氨基水杨酸各剂量治疗组在第1天腹腔注射MCT 50 mg/kg ，对照组注射等体积生 理盐水。从第2天开始，5-氨基水杨酸各剂量治疗组分别给予5-氨基水杨酸50、 100、150 mg/kg/d和200 mg/kg/d灌胃，共30天。第32天，对各组大鼠进行以下检 测：(1)统计大鼠的体质量(body mass)，计算大鼠体质量增量(weight increment)及 其生存率；(2)右心导管法测定肺动脉压力(SPAP,DPAP,MPAP) ；(3) 分离右心室， 测定右心室肥厚指数(RVHI) 。 结果：1. Control 组大鼠的体质量和体质量增量均较高于PAH 组大鼠(P 0.05) ； 5-氨基水杨酸治疗后，除5ASA-150 组和5ASA-200 组，其余两组大鼠的体质量 和体质量增量也较 PAH 组有明显升高(P 0.05) ；5-ASA 治疗组合计生存率较 PAH 组显著升高(P 0.05) 。 2. PAH 组大鼠的SPAP, DPAP, MPAP 和RVHI 均高于Control 组(P 0.05) ；除 5ASA-200 组的MPAP 和RVHI 外，其余5-ASA 组的SPAP, DPAP, MPAP 和RVHI 较PAH 组有明显降低(P 0.05) 。 结论：5-ASA 能够降低野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠的肺动脉压力，减轻右心 室肥厚，改善生存率。 I 上海交通大学医学院硕士论文 第二部分 孤核受体Nur77 参与肺血管内皮细胞 凋亡和增殖的调控作用 目的：探讨 Nur77 在肺血管内皮细胞凋亡与增殖过程中的调控作用，以及影响 Nur77 表达的信号通路。 方法：通过建立MCT 诱导的PAH 大鼠模型，采用5-ASA 进行药物干预。通过 Western Blot 、RT-PCR 和免疫荧光方法检测孤核受体Nur77 在肺动脉内皮细胞内 的表达情况。运用HE 染色观察肺血管内皮细胞增殖情况。并进一步通过Western Blot 和（或）RT-PCR 检测炎症介质NF-κB p65 、IκBα、COX-2 、iNOS，凋亡相 关蛋白 Bcl-2 、caspase-3，增殖细胞核抗原 PCNA 、MMP-2/-9、TIMP-1/-2 以及 观察pAkt ，pERK ，p-p38 MAPK 等信号转导因子的表达。 结果：1. 与PAH 组相比，Control 组和5-ASA 各治疗组大鼠肺血管内皮细胞的 Nur77 的表达有显著升高(P 0.05) 。2. Control 组和5-ASA 各治疗组大鼠的炎症 介质NF-κB p65 、COX-2 、iNOS，抑凋亡蛋白Bcl-2 ，MMP-2/-9，和信号转导分 子pAkt ，pERK 和p-p38 MAPK 的表达有明显下调(P 0.05) 。3. 5-ASA 各治疗 组的IκBα、caspase-3 和TIMP-1/-2 的表达较PAH 组有明显上调(P 0.05) 。 结论：1. 5-氨基水杨酸通过Nur77 发挥其抗炎、抑增殖、促凋亡的作用。2. pAkt ， pERK 和p-p38 MAPK 等信号传导通路来调控Nur77 的表达。3. Nur77 通过调节 NF-κB/IκBα 来抑制肺血管