1.2　基因工程的基本操作程序第2课时学案人教版选修三.doc

1.2　基因工程的基本操作程序 第2课时 学案 人教版选修三 1．PCR原理 2．PCR反应的过程及结果 (1)PCR反应过程 ①变性：当温度上升到90_℃以上时，双链DNA解聚为单链，(如下图)。 ②复性：系统温度下降至50_℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，(如下图)。 ③延伸：当系统温度上升至72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、G、C)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，(如下图)。 (2)结果 ①PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都包括变性、复性、延伸三步。 ②两引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。 特别提醒 1.DNA复制需要引物的原因：DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链。 2．DNA分子复制的人工控制 解开螺旋：在80～100 ℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。 恢复螺旋：在50 ℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。 复制条件：缓冲液、DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶和两种引物。 反应场所：PCR仪。 PCR技术中的引物： ①含义：引物是一小段单链DNA或RNA分子。 ②作用：为DNA聚合酶提供合成的3′端起点。 ③种类：扩增一个DNA分子需要2种引物。 ④数目：引物数目等于新合成的DNA子链数目