.质粒的提取.pptVIP

分子细胞遗传学实验 1.严格遵守实验室安全管理制度 2.严格按照实验要求进行实验 3.实验分组5人一组,可以自由组合 平时成绩, 考勤和课堂表现, 50% 实验及实验报告, 50% 实验报告评分细则 实验原理 10分 实验目的 5分 仪器材料和试剂 10分 实验步骤 20分 实验结果与分析 45分 (其中,实验结果20分, 结果分析25分) 心得体会 10分 考试成绩 实验一、质粒DNA的提取 一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材与试剂 四、实验步骤 一、实验目的 学习和掌握试利用试剂盒碱裂解法提取质粒用于原位杂交探针的标记 二、实验原理 在pH值介于12.0-12.5范围内 线性的DNA双螺旋结构解开而被变性 当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复pH至中性时， 共价闭合环状的质粒DNA的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确， 线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA，蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。 碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离