2015-2016学年人教版选修三1.2基因工程的基本操作程序课件(22张).ppt
1.2基因工程的基本操作程序 第一步:目的基因的获取 第二步:基因表达载体的构建 第三步:将目的基因导入受体细胞 第四步:目的基因的检测与鉴定 1)从基因所在的生物体直接获取 利用PCR技术扩增目的基因 3)人工合成 2)mRNA反转录成cDNA 目的基因的获取 4)从基因文库中获取目的基因 ②用__________切割目的基因,使其产生 。 ①用一定的 切割质粒,使其出现一个切口,产生_________。 (基因工程的核心) ③将切下的目的基因片段插入质粒的_____处,再加入适量__________,形成了一个重组DNA分子(重组质粒)。 限制酶 黏性末端 同种限制酶 同种黏性末端 切口 DNA连接酶 基因表达载体的构建 (一)构建目的 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。 (二)构建零件及其作用 ①目的基因 ②启动子 基因表达载体的组成 RNA聚合酶识别和结合的一段特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,RNA聚合酶与之结合才能驱动基因转录出mRNA,进而获得需要的蛋白质。 ③终止子 ④标记基因 一段特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端,作用是使转录在所需要的地方停止。 鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 常用的受体细胞: 动植
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