显微镜切片的制作及正确观察方法_时广兴.pdf

北方药学2011 年第8 卷第7 期 93 显微镜切片的制作及正确观察方法 时广兴（山东省邹城市卫生职工中等专业学校 邹城 272000） 摘要：显微镜作为医学观测的重要器材，在形态组织、结构特征、病理研究等方面有着不容忽视的作用，它是医学研究人员的左 膀右臂。在观察某些较为细小的组织结构或者某些菌类微小变化时，常采用切片的形式在显微镜下放大具体化，使得肉眼可以 看见，为医学研究的发展进步做出巨大贡献。本文对于显微镜切片的制作及正确的观察方法进行了简单探讨。 关键词 显微镜 观察 切片 制作 ： + 中图分类号：R361.2 文献标识码：B 文章编号：1672-8351（2011）07-0093-02 切片是玻片标本的一种，是用从生物体上切取的薄片制 2.1 取材、固定 成的玻片标本，如椴树茎的永久横切片。是一种供光学显微镜 动物切片取材时，由于动物组织结构自身的霉会使动物 或者电子显微镜观察的动植物组织薄片。根据不同要求，可以 死后或者离体后的组织迅速分解，所以，被取材的动物在乙醚 用刀片进行徒手切片，也可以将组织块包埋于石蜡或火棉胶 麻醉下或以不同方法处死后，迅速切成适当的小块（1.0 立方 中或以低温冰冻，用切片机切片。切成5～10 微米薄片，供光学 厘米大小）立即投入固定剂（fixative）中进行固定，使组织中蛋 显微镜观察。这样可以使很多微小的组织结构呈现在人们的 白质迅速凝固，防止组织自溶或腐败，以保持生活状态下的结 肉眼下，无论是教学演示还是医学研究都具有很重要的意义。 构，以免对后期观察造成过大误差影响。植物切片取材时，应 1 显微镜切片的定义及适用对象 选择组织结构特征明显的部位切取。常用的固定液有Susa 液、 在医学上切片应称作组织切片或病理切片。将手术取下 甲醛、Bouin 液、酒精、醋酸、苦味酸等。 来的病理组织或可疑的组织固定、封腊，经过切片机切成组织 2.2 脱水、透明、浸蜡、包埋 薄片，然后固定在玻片面上，进行染色，这就是切片。最后将制 脱水、透明、浸蜡、包埋这几个步骤主要是为了将组织包 作好的切片放在显微镜下观察，根据其病理细胞的特征，进行 埋在较硬的物质即石蜡中，以便于制备薄的切片。普通固定液 病理学的组织定性。材料比较疏松的就做成涂片，致密一些的 多为水溶液，所以脱水液可选择不同浓度的酒精。组织经过取 一般就做切片，只用少量材料或者材料比较小的应该做装片。 材固定后，一般经由70％ ，80％ ，90％ ，95％ ，以至无水酒精的脱 不同医学要求或者切除对象组织结构不同，导致切片的 水程序，各级浓度酒精内处理的最短时间分别为2～4 小时即 类型也不一致，常见的是石蜡切片，制作简单而且方便。除了 可达到脱水的要求。因为石蜡不溶于酒精而溶于二甲苯，因而 石蜡切片之外，在制作较大结构（如眼球、睾丸等）的切片时， 组织块经脱水后须再用二甲苯替代出酒精。组织块浸入二甲 常用火棉胶包埋法；骨和牙等坚硬的组织，可用弱酸（稀硝酸） 苯后逐渐变得透明，故此步骤称为透明。不同组织特性不同， 脱钙后，用石蜡或火棉胶切片法制成切片标本。另外，为了较 透明的时间也不同。为了置换出组织中的二甲苯，可以将透明 好地保存细胞内的酶活性或尽快制成切片标本的需要，可选 好的组织块置入已在温箱（56～58℃）内熔化的石蜡内，放置适 用冷冻切片，它是将组织先在低温下快速冻结，经直接切片后 当时间。然后，再浸入已融化的石蜡中进行浸透、包埋，使石蜡 进行染色，或将组织块置入液氮（-196℃）内快速冷冻，用恒冷 冷却凝固，即得坚硬的组织蜡块，经过修整即可用于切片。 箱切片后进行染色。 2.3 切片 2 显微镜切片的制作方法 2.3.1 徒手切片：徒手切片是指手持刀片将新鲜的或固定的实 显微镜下切片的制作方法，本文以石蜡切片为例简单介 验材料切成薄片的制作方法。徒手切片前，应先准备好一个盛 绍切片的制作方法。 有清水的培养皿。在切片时，用左手的拇指与食指、中指夹住 3 讨 论 的家庭