张新祥《生化分析》酶法分析-陈露 翟筠秋.pptVIP

* 三、 影响酶催化反应的因素 （一）不可逆性抑制作用 不可逆性抑制作用的抑制剂，通常以共价键方式与酶的必需基团进行牢固地结合而使酶丧失活性，并且不能用透析、超滤等方法除去抑制剂而使酶恢复活力。 （二）可逆性抑制作用 抑制剂与酶以非共价键结合，在用透析等物理方法除去抑制剂后，酶的活性能恢复，即抑制剂与酶的结合是可逆的。 酶法分析 翟筠秋 酶法分析 以酶作为分析工具或分析试剂，测定样品中用一般化学方法难于检测的物质，如酶的底物、抑制剂、活化剂和辅因子等 酶活力测定法中使用的底物是过量的，酶法分析中底物是反应的限制因素 酶法分析 终点测定法 借助某种酶作用，使被测物质定量地进行转变，在转化完成后，测定底物、产物或辅酶物质等的变化量。 终点测定法 酶底物的专一性 反应的平衡 反应液中的酶量 反应底物抑制 单酶反应定量法 单酶反应只需要一种催化酶，用这种反应作底物定量时，可以测定底物的减少量，也可以测定产物的增加量。对含有辅酶的酶，测定辅酶的变化量也是有效的方法。 1. 底物减少量的测定 例：尿酸的定量测定 尿酸在293nm、297nm处具有特征吸收峰，与尿囊素的摩尔吸光系数有明显差别。利用这一性质，通过尿酸酶反应，根据吸光度的减少就可算出尿酸量。 2. 产物增加量的测定 NAD+?+ H+