基因的基本操作程序剖析.pptxVIP

基因工程的基本操作程序;具有柠檬味的西红柿;二、认真探究 掌握规律;（二）阅读课本第9页选段：从基因文库中 获取目的基因，回答以下问题： 1、记忆基因文库的概念和种类 2、部分基因文库就是cDNA文库？ 3、如何从基因文库中得到所需要的基因？ 要求：独立思考，然后举手复述，有不同 意见可补充;（三）阅读课本第10页：生物技术资料，思考并回答以下问题： 1、如何构建基因组文库？构建过程需要 哪些酶？ 2、如何构建cDNA文库？该过程需要哪些 酶？ 3、找出cDNA文库和基因组文库的区别， 记忆并用自己的语言复述 要求：先独立思考，然后举手发言，有不同意见可补充 ;（四）阅读课本：利用PCR技术扩增目的基因，并 完成以下问题;PCR技术扩增的条件：_______________________、 ____________、___________ （前提）、 ___________;逆转录法;三、课堂巩固 拓展延伸;2、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是（ ） A、某生物的全套基因就是一个基因文库 B、将含有某种生物不同的许多DNA片段，导入某个 生物 体内，则这个生物就是一个基因文库 C、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库 D、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫cDNA文库;3、比较 PCR扩增技术和生物体内合成目的基因的异同点;【不同点】： 1.PCR是DNA复制的体外扩增技术 2.体内DNA复制半不连续复制，体外PCR连续复制　　3.体内DNA复制的聚合酶在高温时会变性，PCR需 要耐热的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶）。 4.PCR需要经历三十次循环使特定DNA片段放大数百万倍。 5.DNA复制需要校对以保证忠实性，PCR不需要校对。 6.引物不同：体内DNA复制需要RNA，而且体内引物要除去，PCR需要两个人工合成的DNA引物，不需要切除。 　;;利用PCR技术扩增;;基因表达载体的作用：;不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是： （1） 生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达； （2） 通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录； （3） 目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记； （4） 为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等； （5） 有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。;请阅读课本11页：基因表达载体的构建，思考并回答以下问题： 1、基因表达载体包括几部分？ 2、各部分的作用分别是什么？ 3、回忆必修二基因表达载体的构建过程，并用自己的语言复述 要求：独立思考，用自己的语言归纳复述，然后小组讨论并举手发言，有不同意见可补充;（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。 （2）用___________切断目 的基因，使其产生_____ ____________。;请阅读课本12页—13页：将目的基因导入受体细胞部分，思考并回答以下问题： 1、将目地基因导入植物细胞的方法有哪些？ 2、农杆菌转化法中利用的是农杆菌的那些特点？ 3、理解记忆图1—11：复述农杆菌转化法的 过程；将目的基因插入到T-DNA的哪部分？ 4、基因枪法适用于哪类受体细胞？ 要求:???立思考，然后举手发言;(三)将目的基因导入受体细胞;方法;1、将目的基因导入植物细胞;请阅读课本13页，思考并回答以下问题： 1、归纳将目的基因导入动物细胞的步骤 2、找出并记忆大肠杆菌细胞的转化方法 要求：独立思考，快速记忆，然后举手发言 ;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ;3、将目的基因导入微生物细胞;请阅读课本14页和15页，思考并回答以下问题： 目的基因的检测包括几个步骤，以及每个检测步骤所用的方法分别是什么？ 要求：认真阅读课本，独立思考，然后小组发言;(四)目的基因的检测与鉴定;知识延伸——DNA分子杂交技术;返 回;4）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料