正常早孕及不明原因复发性流产主动免疫治疗前后血清蛋白组学的比较.pdfVIP

广东医学 2014 年7 月第35 卷第 13 期 Guangdong Medical Journal Jul. 2014 , Vol. 35 , No. 13 .2069. 正常早孕及不明原因复发性流产主动免疫治疗 前后血清蛋白组学的比较* 高克非lA ，许红雁2 ，刘宝玲3 l 广州中医药大学第一附属医院妇科(广州 510405); 2 粤北人民医院妇产科(广东韶关 512026) ; 3 广东省广州市 番禹区何贤纪念医院妇产科(5114∞) [摘要] 目的 探讨不明原因复发性流产(URSA) 患者经淋巴细胞主动免疫治疗后部分血清蛋白的表达是 否与正常早孕者趋近，并重新评价封闭抗体(BA) 的临床价值。方法 选取50 例 BA 阴性的复发性流产患者(病 例纽)和同期 48 例正常初次任娘的早孕妇女(正常平孕纽)为研究对象，应用蛋白质芯片和 SELDI - TOF - MS 技 术检测血清蛋白质谱，将 URSA 主动免疫治疗前与正常早孕组和免疫治疗后分别进行比较，得到两组有统计学差 异的蛋白，再在这两组蛋白中寻找共有部分，并对其进行3 纽间表达趋势的分析。同时也对正常早孕组和 URSA 免疫治疗后的 BA 阳性率进行对比分析。结果 正常早孕纽与 URSA 免疫治疗前比较发现82 个差异蛋白，URSA 免疫治疗后与治疗前比较发现35 个差异蛋白，两者的共有部分有 16 个蛋白，其中正常平孕组和免疫治疗后表达 均高于免疫治疗前的蛋白共有 15 个，均低于免疫治疗前的有 l 个。正常早孕组的 BA 阳性率为 52.1% ， URSA 免 疫治疗后的 BA 阳性率为 92.0% ，两者差异有统计学意义(P 0. 05) 。结论 URSA 患者主动免疫治疗后部分血 清蛋白的表达与正常平孕者趋近，且明显高于或低于 URSA 免疫治疗前，提示该部分蛋白可能参与了正常任娘的 免疫耐受调控机制和 URSA 免疫治疗的疗效机制。 BA 并不是任娘免疫耐受调控的主要机制蛋白，也与主动免疫 治疗的疗效无必然联系c [关键词] 任娘初期;复发性自然流产;主动免疫治疗;蛋白质纽学;封闭抗体 10 -12 周到我院进行产检女性，年龄 22 - 35 岁，平均 复发性自然流产是妇产科常见疾病，全世界的发 病率约为 1% ，其中不明原因复发性流产(unexplained (28.6 :t 5. 09) 岁，追踪至孕36 周无异常表现。两组均排 recurrent spontaneous abortion , URSA) 即同种免疫型 除其他急、慢性疾病。 1. 2 试剂及仪器 BA 试剂盒为美国 BD 公司 EUSA 复发性流产是当前复发性流产研究领域的热点和难 (双抗体夹心法)酶免试剂盒。淋巴细胞分离液为美 点，近年来基因组、转录组和蛋白组研究取得了显著进 国 Sigma 公司产品;芯片结合缓冲液、尿素缓冲液、芥 展 1 。本研究应用蛋白组学的表面增强激光解吸电离 飞行时间质谱(Su由ce Enhanced Laserdesorption Ioniza- 子酸等血清处理试剂均为美国 Sigma 公司产品;WCX2 tion Time of Flight Mass Spectromet巧， SELDI 一 TOF - 蛋白芯片及分析系统为美国 Ciphergen Biosystems 公司 产品。 MS) 结合蛋白质芯片技术对正常早孕妇女、URSA 患者 l. 3 标本采集 正常早孕组于初次产检时(孕 10- 免疫治疗前和免疫治疗后3 组样本进行血清蛋白检测 12 周)、病例组于主动免疫治疗前及免疫治疗4 次后2 和综合对比分析，以期证实蛋白相关的该型复发性流 产免疫治疗的疗效机制，从而为以蛋白组为线索进一 周非孕状态时分别抽取空腹外周血两管，每管5 mL ,