大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱及其产ESBLs的研究.docVIP

　　大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药谱及其产ESBLs的研究 作者：陈云波 王震 查长森 邹立林 季敬章 彭颖 吕建新 【摘要】 目的 了解临床分离的54株大肠埃希菌对氨基糖类苷类抗生素的耐药谱及产ESBLs情况，分析氨基糖苷类修饰酶AAC(3)-II的检出率及该酶的一些特征。方法 采用MIC法测定临床分离的54株大肠埃希菌对7种氨基糖苷类抗生素的耐药谱，用NCCLS推荐的酶抑制剂增强纸片扩散法检测产ESBLs菌株，并通过聚合酶链反应、克隆测序和测定重组菌耐药谱对aac(3)-II基因进行研究。结果 54株大肠埃希菌对阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、链霉素、大观霉素和奈替米星的耐药率分别为14.8%、77.8%、59.3%、66.7%、68.5%、61.1%、22.2%；共检测出产ESBLs菌株34株，占63.0%；aac(3)-II基因在54株大肠埃希菌中检出率为88.5%；质粒转化菌产ESBLs且同时检出aac(3)-II基因。重组菌BL21(DE3)/pET26：：aac(3)-II对庆大霉素和卡那霉素有耐药性，对其余5种氨基糖苷类抗生素没有表现出耐药性。结论 大肠埃希菌对庆大霉素的耐药率最高，对阿米卡星的耐药率最低；耐氨基糖苷类抗生素的大肠埃希菌与其产ESBLs有相关性；重组菌BL21(DE3)/pET26：：aac(3)-II仅对庆大霉素和卡那霉素产生耐药。 【关键词】 大肠埃希菌； 氨基糖苷类抗生素； 修饰酶； 超广谱β内酰胺酶； 耐药性 Research on aminoglycoside resistance profiles and producing ESBLs ABSTRACT Objective To investigate the aminoglycoside resistance profiles and producing ESBLs of clinical Escherichia coli strains and analyze the characteristic of AAC(3)-II. Methods MIC tests of 7 aminoglycosides and ESBLs confirmation tests ed 54 strains of E.coli aac(3)-II gene plified by PCR and cloned into pET26b, then and sequenced. Activity of AAC(3)-II ethod. Results The resistant rates of 54 strains of E.coli to amikacin, gentamicin, kanamycin, tobramycin, streptomycin, spectinomycin, ilmicin icin and kanamycin, but not other 5 aminoglycosides. Conclusions Fifty-four strains of E.coli had the highest resistant rate to gentamicin ikacin. ESBLs-producing strains ostly in aminoglycoside -resistance E.coli. The aac(3)-II gene only mediates resistance to gentamicin and kanamycin. KEY odifying enzymes; Extended-spectrum beta-lactamases; Antibiotic resistance 大肠埃希菌(E.coli)是条件致病菌，2002年全国细菌耐药性监测网对所属57家三级甲等 医院 的调查发现，其临床分离率列第一位(14.2%)［1］。目前国内对大肠埃希菌的多重耐药性已引起很大的重视，对β-内酰胺类、氨基糖苷类抗生素(aminoglycosides)的耐药机制有较多的研究，但两者相关性的研究还不多。以54株从临床分离的大肠埃希菌为研究对象，测定菌株对7种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)及检测其产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)，为临床合理有效地应用抗生素提供依据；同时克隆aac(3)-II基因到pET26b，检测重组菌BL21(DE3)/pET26：：aac(3)-II对氨基糖苷类抗生素的耐药谱，为进一步研究aac(3)-II基因奠定基础。 1 材料和方法 1.1 实验菌株及质粒 收集从2005年2～8月温州医学院附属第一医院临床送检的血液、腹水、尿液等无菌体液标本分离得