基于i-motif+DNA构型变化和纳米金紫外-可见吸收光谱的pH测定.pdfVIP

第32卷，第4期 光谱学与光谱分析 2 01 and 2年4月 SpectroscopySpectralAnalysis April，2012 基于i-motif DNA构型变化和纳米金 紫外一可见吸收光谱的pH测定研究 2 钟坚海1’2～，郭良洽n，吴金梅3，陈金凤1’2～，陈章捷h 1．龙岩出入境检验检疫局，福建龙岩364000 2．国家矿产品检测重点实验室，福建龙岩364000 3．福州大学食品安全分析与检测教育部重点实验室，福建福州 350108 摘要利用纳米金对DNA构型的区分效应设计了一种快速灵敏可视化的pH计。对i-motifDNA-纳米金 体系的紫外可见吸收光谱变化进行了系统研究，考察了盐浓度、i-motifDNA浓度、四重体形成时间以及 DNA序列对pH响应的影响。在既定条件下，纳米金的紫外一可见吸收光谱在pH5．3～7．0范围内呈现规律 性变化，在520nlTl处的吸光度逐渐增大，在700 nrn处的吸光度逐渐减小，纳米金的颜色逐渐由蓝紫色变化 至红色。该pH计具有纳米金无需修饰、可视化、成本低、速度快等特点，有望用于某些pH值发生变化的 生命过程的监测。 DNA 关键词纳米金；紫外一可见吸收光谱；比色法；pH；i-motif 中图分类号：0433．5文献标识码：A 过氢键作用发生配对[6]，从而形成一种分子内的C四重体结 引 言 构；在碱性条件下，由于c碱基去质子化，四重体结构将重 ssDNA 新打开。因此通过改变pH可以很方便实现对i-motif pH的测定涉及环境监测、工业生产及生物医药等各个 结构的调节，被用于质子驱动的DNA纳米机器的设计[7。9]。 领域，同时，pH对生物体的生命活动也起着重要的调控作 文献[1““]则巧妙的将巯基修饰的i-motifDNA通过Au—s 用，某些疾病的发生往往伴随着细胞组织pH的变化，因此 键修饰到纳米金的表面，利用pH调控四重体结构的折叠与 pH传感器在疾病的诊断中也有很好的应用。 打开，从而实现纳米金的聚集与分散，通过观察溶液颜色的 金纳米粒子的表面等离子共振吸收与颗粒之间距离有密 变化，可以非常直观的指示溶液的pH。然而，该方法由于需 切的联系，聚集状态不同时，其表面等离子共振吸收也不 要对纳米金进行修饰，因此过程繁琐，而且还存在检测成本 同，颜色表现出由红色到蓝色的变化，因此是一种很好的指 高的缺点。 示剂。利用这一颜色变化规律，Mirkin[1]报道了一种脱氧核 糖核酸(deoxyribonucleicacid，DNA)的可视化检测方法。最链和单链DNA，通过肉眼观察纳米金胶体溶液的颜色可以 近，纳米金比色法得到了广泛的应用，文献相继报道了金属 非常直观的判断DNA的含量[1 离子[2|、小分子[3]、生物大分子[41甚至细胞[53的比色检测方DNA直接加到待测溶液中，利用该序列在酸碱度不同的溶 法。 液中所呈现的结构不同(单链或者四重体结构)的特性，通过 近年来，一种富含胞嘧啶(cytosine，C)碱基的DNA重纳米金作指示剂，可在一分钟内通过测定溶液的紫外一可见 复片段(称为i-mo