实验三植物组织水势的测定（小液流法）.doc

第一部分 实验常规仪器使用 一 容量玻璃仪器的使用方法 1、 吸管 吸管是生理生化实验中最常用的卸量容器。 移取溶液时，如吸管不干燥，应预先用所吸取的溶液将吸管冲洗 2 ～ 3 次，以确保所吸取的操作溶液浓度不变。 吸取溶液时，一般用右手的大拇指和中指拿住管颈刻度线上方，把管尖插入溶液中。左手拿吸耳球，先把球内空气压出，然后把吸耳球的尖端接在吸管口，慢慢松开左手指，使溶液吸入管内。当液面升高至刻度以上时，移开吸耳球，立即用右手的食指按住管口，大拇指和中指拿住吸管刻度线上方，再使吸管离开液面，此时管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上。略为放松食指，使液面平稳下降，直到溶液的弯月面与刻度标线相切时，立即用食指压紧管口，取出吸管，插入接受器中，管尖仍靠在接受器内壁，此时吸管应垂直，并与接受器约呈 15 o 夹角。松开食指让管内溶液自然地沿器壁流下。 遗留在吸管尖端的溶液及停留的时间要根据吸管的种类进行不同处理。 使用注意事项： （ 1 ）应根据不同的需要选用大小合适的吸管，如欲量取 1.5 mL 的溶液，显然选用 2 mL 吸管要比选用 1 mL 或 5 mL 吸管误差小。 （ 2 ）吸取溶液时要把吸管插入溶液深处，避免吸入空气而将溶液从上端溢出。 2、. 量筒 在准确度要求不高的情况下，用来量取相对大量的液体。 不需加热促进溶解的定性试剂可直接在具有玻璃塞的量筒中配制。 3、容量瓶 容量瓶具有狭窄的颈部和环形的刻度。是在一定温度下（通常为 20 ℃）检定的，含有准确体积的容器。使用前应检查容量瓶的瓶塞是否漏水，合格的瓶塞应系在瓶颈上，不得任意更换。 容量瓶刻度以上的内壁挂有水珠会影响准确度，所以应该洗得很干净。所秤量的任何固体物质必须先在小烧杯中溶解或加热溶解，冷却至室温后才能转移到容量瓶中。 容量瓶绝不应加热或烘干。 二 分光光度计的使用方法 预热仪器。 为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。 选定波长。 根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。 3）固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度读数为0.2-0.7，选择合适的灵敏度。为此，旋动灵敏度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。 调节“0”点。 轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）。 调节T=100％。 将盛蒸馏水（或空白溶液或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=100％。 测定。 轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后，打开比色皿暗箱盖。 关机。 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。 ?　　注意事项： 　　1）为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。 　　2）比色皿的使用方法： 　　①拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。 　　②清洗比色皿时，一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如比色皿被有机物沾污，可用盐酸-乙醇混合洗涤液（1∶2）浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。 　　每次做完实验时，应立即洗净比色皿。 　　③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干，以保护透光面。 ④测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。 ⑤在实际分析工作中，通常根据溶液浓度的不同，选用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。 三 离心机的使用方法 离心机是利用离心力把比重不同的固体或液体分开的装置。根据转速的不同，可分为低速、高速和超速等不同类型。生理生化实验室经常使用的是低速电动离心机，它们的最高转速是 4 000 r ／ min 。 1. 使用方法 （1） 检查离心机调速旋钮是否处在零位，外套管是否完整无损和垫有橡皮垫。 （2） 离心前，先将离心的物质转移入合适的离心管中，放在台秤上平衡。如不平衡，可调整缓冲用水或离心物质的量。将平衡好的套管放在离心机十字转头的对称位置上。并盖好离心机盖。 （4） 接通电源，开启开关。 （5） 平稳、缓慢地移动调速手柄（约需 1 — 2 分钟）至所需转速，待转速稳定后再开始计时。 （6） 离心完毕，将手柄慢