色谱柱的维护保养.ppt

* * * Shall we show gradient hilic 咨询色谱柱制造商获取推荐的清洗程序和限制条件 采用不带缓冲盐的流动相冲洗色谱柱以去除缓冲盐 采用10倍柱体积的互溶溶剂冲洗，如甲醇或乙腈 采用20倍柱体积的强溶剂（THF或IPA）以去除强吸附样品组分 颠倒程序并用流动相平衡 色谱柱的清洗 色谱柱保存条件影响色谱柱的使用寿命 从不用缓冲盐保存色谱柱（长期保存） 采用10倍柱体积且不带缓冲盐的流动相冲洗以除去缓冲盐 对硅胶基质色谱柱一些典型的溶剂保存条件 反相: 65/35 乙腈/水 正相: 异丙醇或己烷 离子交换: 甲醇 SEC或二醇: 0.05% NaN3水溶液或10%甲醇 色谱柱的保存 保护您昂贵的分析色谱柱 延长柱寿命 保证最佳的色谱柱性能 保证质量分析结果 最大程度降低故障时间 节约成本 保护您的HPLC系统 最大程度减少系统故障 保证质量结果 节约成本 色谱柱的维护保养总结 保护柱 来自于活塞密封圈和进样阀转子的颗粒物，如不被除去将堵塞色谱柱 0.2 μm针式滤头 使用亚- 2 μm的色谱柱时，每个样品必须通过0.2 μm的多孔滤膜过滤 流动相过滤 缓冲盐必须每日配制，并通过0.2 μm的多孔滤膜过滤 在线过滤器 强烈建议在自动进样器和保护柱之间使用0.2 μm的多孔在线过滤器 LC/GC杂志 11月1期, 2010 UHPLC技巧与技术 By John W. Dolan “色谱保健” 固定相 填料本身有全多孔（luna等)与核壳(kinetex等)两种 键合相有C18，C8，PFP，Hilic等多种 合理选择固定相，对HPLC的分析结果影响很大 * * HMX RDX 1,3,5-Trinitrobenzene 1,3-Dinitrobenzene Nitrobenzene 2,4,6-Trinitrotoluene 2,4-Dinitrotoluene 3 1 5 4 6 2 7 Kinetex? 2.6 μm PFP 100 x 4.6 mm Kinetex? 2.6 μm C18 100 x 4.6 mm Nitroaromatics * Acquity? BEH? 1.7 μm C18 50 x 2.1 mm Kinetex? 2.6 μm PFP 50 x 2.1 mm Phenolic Isomers o-Methylacetophenone p-Methylacetophenone m-Methylacetophenone 1,2 3 Acquity is a registered trademark of Waters Corporation. BEH is a trademark of Waters Corporation. Phenomenex is in no way affiliated with Waters Corporation. Complementary Selectivity * alpha-Ketoglutaric acid Pyroglutamic acid Glutamic acid GABA 无保留与分离 Kinetex? 2.6 μm C18 50 x 2.1 mm Kinetex? 2.6 μm HILIC 50 x 2.1 mm Isocratic 97:3 5 mM Ammonium formate pH 3.2 / Methanol Isocratic 92.5:2.5:5 Acetonitrile / Water / 100 mM Ammonium formate pH 3.2 好的保留与分离 Toxicology – Neurotransmitters Retention of Highly Polar Compounds * Epinephrine Norepinephrine Little retention (under 30 sec) Kinetex? 2.6 μm C18 50 x 2.1mm Kinetex? 2.6 μm HILIC 50 x 2.1mm Isocratic 97:3 5 mM Ammonium formate pH 3.2 / Methanol Isocratic 92:8 Acetonitrile / 100 mM Ammonium formate pH 3.2 2 minute separation Clinical Toxicology – Neurotransmitters Orthogonal Selectivity 谢谢!! * Introductory statem