石蜡切片免疫组化过程中存在的问题及解决方法_陈勤.pdfVIP

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2017-05-08 发布于浙江
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石蜡切片免疫组化过程中存在的问题及解决方法_陈勤

2009 3 () March2009 33 2 ournalofAnhuiUniversityNaturalScienceEdition Vo.l33 No.2 石蜡切片免疫组化过程中存在的问题及解决方法陈　勤,周　君,胡冠宇 ( , 　2 300 39 ) 　:, . , , 、、, , . :;;; :R392.31　　　　:B　　　　:1000-2162 (2009)02-00 85-04 (), (、、、 ) ( ), [1] 、 , . ., ,, , ,., ,, , , ., , , ,. 1　 , . 1.1　 -1 40 mg·kg,, , ,,, ,, 1 cm×1.5 cm, 10% 15 ～24 h. ,.,, 10 ～15 h. 1.2　、 , 70% 3 h, 80% 3 h, 90%, 95%Ⅰ 2 h, 95%Ⅱ 2 h, 100%Ⅰ 2 h, 100%Ⅱ 2 h., Ⅰ 25 min, Ⅱ 25 min., 50 ℃Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 20 min., , Ⅳ,, , 4 ～8 μm. :200 8-07-10 :(K2007A104 ZC);《》 :　(1958— ), , , , . 86 () 33 1.3　 (Ⅰ)12 min※ (Ⅱ)12 min※100% (Ⅰ)5 min※100%(Ⅱ)5 min※95% 5 min※90% 3 min※80% 3 min※70% 3 min※ 8 min. :, , . [2] ,, , , . ?,, ,,,, [3] .,,, . 2　 SABC. (1 ). 3%, 10 min. . (2 )PBS 2 ～3, 5 min. (3 )., 0.01 M (pH6.0 ), ,5 ～10 min, 1 ～2., PBS 1 ～2 , 5 min; ,, , [4] ,,、、 . (4 ). 5%BSA1, 37 ℃ 20 min. (5 ),., , . (6 ).(, 1 ∶100 1 ∶200 ) 20 ～50 μL; 37 ℃、1 ～3 h 4 ℃. (7 )PBS 3, 5 min.“”, PBS, .,, ;, ,., , ,. (8 ). SABC( IgG) 1, 37 ℃ 1 h. (9 )PBS 3, 5 min. (10 ) SABC. SABC ( - )1, 37 ℃ 30 ～45 min. (11).0.02%Tween20 PBS 3 ～4 , 5 min., ,,,. (12 ) PBS 2, 3 min. (13 ). DAB 20 ～50 μL; 5 ～20 min(). ? 1 ～2