人表皮生长因子（EGF）酶联免疫分析（ELISA）.doc

人表皮生长因子(EGF)酶联免疫ELISA） 试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定中(EGF)水平。用纯化的(EGF)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入(EGF)再与HRP标记抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMB在酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的(EGF)呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品(EGF)浓度。 -20℃保存，但应避免反复冻融μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为3600ng/L，2400ng/L ，1200ng/L，600ng/L，300ng/L）。 加样：分别设空白孔（空白