Bio_Dot生物芯片点样技术及需注意的技术问题_丁先锋.pdfVIP

研究简报 生命科学仪器 2007第5卷/ 3月刊 Bio-Dot生物芯片点样技术及需注意的技术问题 1 丁先锋 ，徐根民，郭江峰 （浙江理工大学生命科学学院，杭州，310018） 摘要 芯片技术是近些年发展迅猛的一种新的检测手段，它集快速、高通量、高效率于一体。现已广泛运用 于分子生物学研究、疾病诊断与治疗、药物筛选、环境监测等领域。芯片技术的灵敏性、准确性、重复性的这影 响因素很多。本文从BioDot芯片点样仪出发，主要介绍了BioDot点样仪的工作原理及流程、稳压(SSP)的形成及维持 和影响点样效果的影响因素，如点样量、预喷量、预喷压力、点样压力等参数设置的原则等。 关键词 BioDot点样仪； 稳压 （SSP）；芯片技术 中图分类号 0433.1 随着近代分子生物学实验技术和计算机技术的迅 1.1　点样系统的组成 猛发展，以及人类基因组计划(HGP)的初步完成和分 点样系统主要由储液池 、进样 子生物学相关学科的迅猛发展，很多动植物、微生 管(Feed Line)、注射泵(Syringe Pump)、喷样管 [1] (Dispense Line)、阀们(Valve)及点样针(Tip)等组成。如 物基因组序列得以测定 ，标志着现代生命科学研究 已经进入了后基因组时代，研究者把关心的焦点由结 图1所示。 [2] 构基因组学转向功能基因组学 。芯片技术是上个世 纪90年代初发展起来的一门新兴技术，已被美国科 [3] 学促进会列为1998年自然科学领域十大进展之一 。 而芯片技术已成为后基因组时代基因功能分析的最重 [4] 要技术之一 。它综合了分子生物学、半导体微电子 技术、激光化学、计算机科学等众多学科领域的相关 [5] [6] 技术 ，使其具有高度集成化和平行化等特点 。目 前主要应用于以下领域：(1)基因表达分析和基因型、 [7] [8] 基因突变及多态性分析 ；(2)疾病的诊断与治疗 ;(3) [9，10] 药物研究中的应用 等。基因芯片技术的一般步骤 为：(1)探针的设计与合成；(2)芯片支撑物的处理； 图1　BioJet PlusTM点样系统的组成 (3)芯片阵列的点印；(4)芯片的后处理，包括重新水 合化及干燥、UV-交联、封闭及变性；(5)芯片质量检 1.2　点样系统的原理 [11] ＢioJet　PlusTM点样系统是一个由液压驱动的 测 。而这几个步骤中最关键的芯片阵列的点印， 它直接关系着芯片制作的好坏，所以对影响芯片阵列 系统并且需要液体作为媒介将这种压力由注射泵传 点印的影响因素进行研讨是十分有必要的，而点样仪 递到微螺线管BioJet　PlusTM阀门．喷样过程包括 的正确操作又显的格外的重要。本文将对BioDot点样 以下几个步骤：(１)注射泵转移一定数量的液体； 仪的工作原理及影响点样仪点样效果的一些影响因素 (２)阀门打开很短的一段时间；(３)液体从阀门处释 及其排除方法做简要分析。 放并到达喷样针中；(４)液体通过针孔的时候以线 形速率增加并以液滴的形式喷出 （如果液体的量很