第1节 光度法基本原理精要.pptVIP

2. 物质对光的选择性吸收及吸收曲线 3.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁 能级跃迁 讨论 讨论 ?⑴　σ→σ＊跃迁 ? ⑶ π→π＊跃迁 生色团与助色团 2.金属配合物的紫外—可见吸收光谱 电荷转移吸收光谱 2.摩尔吸光系数ε的讨论 3.偏离朗伯—比耳定律的原因 （1）物理性因素 非单色光作为入射光引起的偏离 讨论: 讨论: A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10－?εbc )  (2) 化学性因素 溶剂的影响 一般溶剂极性增大， π-π *跃迁吸收带红移,n-π *跃迁吸收带蓝移,如下图所示。分子吸光后，成键轨道上的电子会跃迁至反键轨道形成激发态。一般情况下分子的激发态极性大于基态。溶剂极性越大，分子与溶剂的静电作用越强，使激发态稳定,能量降低。即π *轨道能量降低大于π轨道能量降低，因此波长红移。而产生n-π * 跃迁的n电子由于与极性溶剂形成氢键，基态n轨道能量降低大，n-π*跃迁能量增大，吸收带蓝移。 透过度T : 描述入射光透过溶液的程度: T = I t / I0 吸光度A与透光度T的关系: A ＝ －lg T 朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量； 摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1 mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度； 吸光系数a(L·g-1·cm-1）相当于浓度为1 g/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。 透光度（透光率）T （1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数； （2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关； （3）可作为定性鉴定的参数； （4）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。 （5）εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。ε105：超高灵敏； ε=(6～10）×104 ：高灵敏； ε2×104 ：不灵敏。 （6）ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。 摩尔吸光系数ε 的讨论 标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗伯—比耳定律的偏离。 引起这种偏离的因素（两大类）： （1）物理性因素，即仪器的非理想引起的； （2）化学性因素。 难以获得真正的纯单色光。 朗—比耳定律的前提条件之一是入射光为单色光。 分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对朗伯—比耳定律的正或负偏离。 非单色光、杂散光、非平行入射光都会引起对朗伯—比耳定律的偏离，最主要的是非单色光作为入射光引起的偏离。 假设由波长为λ1和λ2的两单色光 组成的入射光通过浓度为c的溶液，则： A 1＝lg（Ｉo1 /Ｉt1 ）＝ε1bc A 2＝lg(Ｉo2 /Ｉt2 ）＝ε2bc 故： 式中：Ｉo1、Ｉo2分别为λ1、λ2 的入射光强度； Ｉt1、Ｉt2分别为λ1、λ2 的透射光强度； ε1、ε2分别为λ1、λ2的摩尔吸光系数； 因实际上只能测总吸光度A总，并不能分别测得A1和A2，故 A总 ＝ lg（Ｉo总/Ｉt总 ) ＝lg(Io1+Ｉo2)/(Ｉt1+Ｉt2） ＝ lg(Io1+Ｉo2)/(Ｉo110-ε1bc +Ｉo210-ε2bc ） 令： ε1-ε2 ＝ ?? ； 设： Ｉo1 ＝Ｉo2 A总 ＝ lg(2Io1)/Ｉt1(1＋10 - ?εbc ） ＝ A 1 + lg2 - lg(1＋10 - ?εbc ) 讨论: 因实际上只能测总吸光度A总，并不能分别测得A1和A2，故： A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10－?εbc ) (1) ?? = 0； 即： ? 1= ? 2 = ? 则： A总 ＝lg（Ｉo/Ｉt）＝ ? bc (2) ?? ≠0 若 ?? 0 ；即? 2 ? 1 ； － ?? bc0, lg(1＋10 ?? bc )值随c值增大而增大，则标准曲线偏离直线向c 轴弯曲，即负