(ICP-OES)-曾晓雯原始.ppt-中山大学公共卫生学院.ppt

中山大学公共卫生学院 预防医学系 1. 实验目的 熟悉人发样品无机化的前处理方法 理解电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）测定多元素的方法 * 金属元素与人体健康 铜Cu：能促进铁吸收；缺Cu影响胶原合成，生长发育迟缓 铁Fe：与卟啉和蛋白质形成血红蛋白和肌红蛋白, 具有贮存和运输氧的作用；缺铁性贫血，生长发育迟缓 锰Mn：可减少肝脏内脂肪的含量，激活多糖聚合酶和半乳糖聚合酶，促进骨髓造血 铅Pb：损伤神经系统，消化系统，男性生殖系统且影响骨骼的造血功能；儿童 100μg/L * 头发是机体金属排泄的重要器官之一, 头发每月的生长速度是1 cm , 因此它可以反映人体一个时期微量元素的摄人和代谢情况, 而它可以作为临床判断机体微量元素水平的一种辅助途径。 * 2. 实验原理 等离子体提供能量使样品蒸发、形成气态原子/离子、并进一步使气态原子/离子激发而产生光辐射 将光源发出的复合光经色散分解成按波长顺序排列的谱线，形成光谱 用检测器检测光谱中谱线的强度而进行定量分析（当温度一定时谱线强度与被测元素浓度成正比） * 对ICP-OES试样的要求 溶液要过滤、澄清 溶液的酸、碱度：酸度应在0.1%以上，一般不要超过5% 消解方法：水溶；酸/混合酸溶解；微波消解；灰化 * ICP-OES的头发样品前处理 试样溶液（HNO3） 样品无机化（H2O2） * 3. 实验仪器与试剂 ICP-OES光谱仪；电热板 三角瓶，漏斗，50 ml容量瓶，25ml 比色管，滤纸 重金属混合储备液（10 mg/L），2% HNO3；浓HNO3 ；H2O2，去离子水 * 4. 实验步骤 （1）标准溶液的配置：用2%的HNO3溶液将10 mg/L的金属混合标液（混标中各元素的浓度均10 mg/L）配置成以下的标准工作溶液，如下： * 标液浓度 (μg/L) 10 50 100 500 1000 10 mg/L 稀释方法（逐级稀释） 5 ml的0.1 mg/L 标液 2.5 ml的1 mg/L标液 5 ml的1 mg/L标液 2.5 ml的10 mg/L标液 5 ml的10 mg/L标液 已经配好 4. 实验步骤 （2）试样的准备 将头发剪成1cm发段，用中性洗涤剂洗净，洗净，用布氏漏斗，用高纯水淋洗，于110°C烘干（已经完成）； 精确称量干燥头发0.2 g左右至于三角瓶内，加入10 ml浓HNO3和1ml H2O2 ，在电热板上加热尽干，取下稍冷后再加2 ml HNO3和1ml H2O2 ，加热浓缩约0.5 ml，用少量高纯水稀释； 多次少量用高纯水将三角瓶的溶液全部过滤至25 ml比色管中，最后用高纯水定容，摇匀，待测定； * 4. 实验步骤 （2）试样的准备 称两份头发样品，各0.2g左右（记录数值），做两个平行样品； 加标回收：称0.2 g左右头发后加入0.25 ml 10 mg/L的混标，处理步骤同样品（实际各元素加标浓度分别为100 μg/L）； 试剂空白：不加头发，处理步骤同样品。 * 6. 注意事项 所有实验使用的器皿都用10%硝酸浸泡48h，然后用去离子水和高纯水洗净（实验前准备） 样品加入浓HNO3时要小心，消化过程中取下三角瓶加入 H2O2 时，要将试样稍微冷却，慢慢加入，以免剧烈分解，将试样溅出 注意不要烧焦样品溶液 * 5. 数据处理和实验报告书写 简述实验目的、原理和过程 记录标准溶液浓度和样品中金属元素的含量，计算出人发中Cu、Pb、Fe、Mn的含量（μg/g): C×0.025/m发 列出计算过程，计算空白加标回收率和样品加标回收率（样品加标回收率：分别算出平行1、2头发的元素含量μg/g后，取平均值作为加标头发的元素本底含量，在此基础上再计算加标回收率） 讨论实验数据（平行样和加标回收率），查阅文献对数据的卫生学意义进行讨论 * 通过这次实验，你体会到ICP-OES分析法有哪些优点？ 实验设置空白加标回收和样品加标回收的意义？ 查阅文献，对测定人发的重金属含量进行讨论 * 实验分组 分成4大组（组1、2、3、4） 组1同学配置一套多元素标准溶液，全班共用 其他3个组各自又分为3个小组：其中第1个小组负责消解1个试剂空白和1个空白加标；第2个小组负责消解1个试剂空白和1个样品加标；第3个小组负责酸消解2个头发平行样 分别上机测样，记录原始数据（μg/L） * * 组1 小组3 标液浓度 (μg/L) 10 50 100 500 1000 10 稀释方法（逐级稀释） 5 ml的0.1 mg/L 标液 2.5 ml的1 mg/L标液 5 ml的1 mg/L标液 2.5 ml的10 mg/L标液 5 ml的10 mg/L标液 已经