杜仲糖类成分的气相色谱质谱联用分析.docVIP

　　杜仲糖类成分的气相色谱质谱联用分析 【摘要】 目的研究杜仲的糖类成分，为杜仲开发利用提供实验依据。方法提取杜仲的游离糖成分和多糖成分，用三氟乙酸将多糖水解，依次加入盐酸羟胺、吡啶和乙酸酐进行乙酰化反应，测定杜仲游离糖成分和多糖成分的GC-MS图，分析杜仲的糖类成分。结果通过质谱分析，确定杜仲含有D-木糖、D-核糖、D-阿拉伯糖、D-木糖醇、D-呋喃葡萄糖，α-D-吡喃葡萄糖，β-D-吡喃甘露糖、葡萄糖醇、肌醇、纤维二糖、曲二糖和蔗糖等糖类成分。结论杜仲中的糖类成分种类丰富，气相色谱和质谱联用技术能够有效地分析杜仲的糖类成分。 【关键词】 杜仲； 游离糖； 多糖； 气相色谱-质谱 　　Abstract：ObjectiveTo study the carbohydrate ponents of Cortex Eumiae and provide experimental evidence for the exploitation of Cortex Eumiae.MethodsThe free sugar and polysaccharides of Cortex Eumiae ine hydrochloride,pyridine and acetic anhydride acetylation for reaction.After that,Gas chromatography-mass(GC-MS) spectrometry of free sugar and polysaccharides iae consist of D-xylose,D-ribose,D-arabinose,D-xylitol,D-glucofuranose,α-D-glucopyranos-e,β-D-mannopyranose,D-glucitol,cellobiose,kojibiose and sucrose.ConclusionThere are many kinds of carbohydrates in Cortex Eumiae and the GC-MS method can analyze the sugar position of Cortex Eumiae effectively. 　　Key iae; Free sugar; Polysaccharide; Gas chromatography-mass 　　杜仲系杜仲科植物杜仲Eumia ulmoides Oliv.的干燥树皮，主产于湖北、四川、贵州、云南、陕西等地［1］，性温，具有补肝肾、强筋骨、降血压、安胎等诸多功效［2］。杜仲的糖类成分是近年来发现的杜仲的又一活性成分。 现代 药理研究表明糖类成分有提高免疫力、抗肿瘤、抗衰老等作用［3］。本文 参考 相关 　　2.4 多糖供试品的制备取上述“2.2”项提取的多糖样品10 mg，加入2 mol·L-1的三氟乙酸6 ml，100℃水浴水解8 h，60℃减压蒸干，加入甲醇少许减压蒸干，反复3次除去三氟乙酸，90℃烘箱中干燥12 h除尽水分，加入10 mg盐酸羟胺，0.6 ml吡啶90℃水浴30 min，冷却后加入1.6 ml乙酸酐，继续90℃水浴反应30 min，备用。 　　2.5 色谱条件DB-5型石英毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度250℃；流量1ml·min-1；升温程序：120℃保持3 min，至250℃每分钟升温8℃，250℃保持10 min；质谱：Ei源，电离电压70 eV；检测器：FID检测器，温度220℃；进样量0.2 μl，分流比30∶1，扫描范围20～600 amu。 　　2.6 杜仲糖类成分的GC-MS图见图1～2。 　　2.7 杜仲游离糖及杜仲多糖乙酰化衍生物GC-MS分析结果见表1～2。表1 杜仲游离糖乙酰化衍生物GC-MS分析结果，表2 杜仲多糖乙酰化衍生物GC-MS分析结果（略）。 　　杜仲游离糖的总离子流图，如图1所示，其质谱解析结果列于表1，经碎片分析并利用标准质谱NIST库进行检索，图1中的13个色谱峰被确定为游离糖的乙酰化衍生物，从表1的峰面积百分比看出，蔗糖所占的比例最大，为59.21%。葡萄糖所占比例和种类较多，另外D-木糖、D-核糖、D-阿拉伯糖、D-木糖醇、β-D-吡喃甘露糖、肌醇、纤维二糖、曲二糖也占有一定比例。 　　杜仲多糖的总离子流图，如图2所示，其质谱解析结果列于表2，经解析，图2中的6个色谱峰被确定为单糖的乙酰化衍生物。从结果发现，杜仲多糖是由D-木糖、D-核糖、D-阿拉伯糖、D-呋喃葡萄糖、α-D-吡喃葡萄糖和D-葡萄糖醇等6种单糖组成，其中D-呋喃葡萄糖所占比例最大，为36.79%。 　 　3 讨论