桂枝、柴胡与白芍分别配伍的相关药效学研究.docVIP

　　桂枝、柴胡与白芍分别配伍的相关药效学研究 【摘要】 目的 研究 桂枝、柴胡与白芍分别配伍后的相关药效学作用。 方法 以酚红比色法观察生理状态下小鼠胃排空、小肠推进功能；放免法测生理状态下小鼠血清内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）；给予小鼠以1.1%冰醋酸腹腔注射致痛、致炎法观察药物的抗炎、镇痛作用。结果 与正常组比较，柴芍低剂量组抑制小鼠胃排空、小肠推进功能，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；柴芍高剂量组抑制小鼠胃排空、小肠推进功能（Ｐ＜０．００１）；各药对组对正常小鼠血清ＥＴ含量无明显 影响 （Ｐ＞０．０５）。与模型对照组比较，桂芍低和高剂量组、柴芍低剂量组均能减少小鼠扭体次数，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；柴芍高剂量组减少小鼠扭体次数，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；桂芍高剂量组降低小鼠腹腔毛细血管通透性，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论 柴芍配伍后具有解痉作用与镇痛作用；桂芍配伍后具有镇痛、抗炎作用，且桂芍配伍后在镇痛作用方面具有协同作用。 【关键词】 桂枝；柴胡；白芍；配伍；药效学；小鼠 １ 材料与方法 １．１ 材料 １．１．１ 动物 昆明种小鼠２５０只，普通级，体质量（２０±２）ｇ，雌雄各半，由湖南中医学院动物实验中心提供实验动物。 １．１．２ 药物 桂枝、柴胡、白芍。全部药材购自湖南中医药大学第一附属 医院 药房，经湖南中医药大学药植教研室鉴定为正品。硫酸阿托品注射液（无锡市第四制药厂，批号：９９０１０２）；阿司匹林片（ 中国 上海信谊药厂，批号：９９０２０１－１９３号）。 １．１．３ 仪器 ＦＡ１００４ 电子 分析 天平（上海精科天平厂）； ＤＤ－Ｓ型低速离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）；半自动生化光谱分析仪（法国西克曼公司）。 １．１．４ 试剂 ＥＴ试剂盒（北京科美东雅生物技术有限公司提供，批；苯酚红，分析纯（广州化学试剂厂，批号：９８０９１０）；伊文思蓝（上海化学试剂采购供应站分装厂，批号：９９０８０７）。 １．２ 方法 １．２．１ 动物分组 先按性别和体质量分层，用随机数字表法随机分为２５组。每组为１０只，各组均为雌雄各半。小鼠胃排空、小肠推进功能实验及小鼠血清ＥＴ含量测定共分１３组，正常组，桂枝低、高剂量组，白芍低、高剂量组，柴胡低、高剂量组，桂芍低、高剂量组，柴芍低、高剂量组，阿托品组，阿司匹林组，其中阿托品组为胃排空、小肠推进功能的阳性药物对照组，阿司匹林组为血清ＥＴ的阳性药物对照组；冰醋酸致炎、致痛小鼠扭体次数、腹腔血管通透性实验共分１２组，测生理状态小鼠胃排空、小肠推进功能分组中正常组换为模型对照组，去阿托品组，余组同上。 １．２．２ 药物剂量按体表面积换算，相当于成人（７０ ｋｇ）剂量的５倍为小鼠的低剂量，１０倍为高剂量。测生理状态小鼠胃排空、小肠推进功能；生理状态小鼠血清ＥＴ；冰醋酸致炎、致痛小鼠扭体次数、腹腔血管通透性的各组小鼠用药量（生药量）均为：桂枝低剂量６．５ ｇ／ｋｇ、高剂量１３ ｇ／ｋｇ；白芍低剂量６．５ ｇ／ｋｇ、高剂量１３ ｇ／ｋｇ；柴胡低剂量６．５ ｇ／ｋｇ、高剂量１３ ｇ／ｋｇ；桂芍低剂量１３ ｇ／ｋｇ、高剂量２６ ｇ／ｋｇ；柴芍低剂量１３ ｇ／ｋｇ、高剂量２６ ｇ／ｋｇ。乙酰水杨酸８０ mｇ／１００ ｇ；阿托品１ ｍｇ／１００ ｇ。 １．２．３ 小鼠胃排空、小肠推进功能测定 采用酚红定量测定法［２］。各组给药灌胃体积为０．２ ｍＬ／１０ ｇ，１次／ｄ，连续灌胃６ ｄ，末次给药１ ｈ后灌胃０．１％酚红０．８ ｍＬ／只，给酚红３０ ｍｉｎ后处死动物，取胃及小肠全段，并将小肠全长均分为５段．将胃肠各段放入３ ｍＬ ０．１ Ｍ ＮａＯＨ液中消化提取。经２４ ｈ消化后以１ ｍＬ ２０％三氯乙酸沉淀蛋白，经３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１５ ｍｉｎ，取上清液１ ｍＬ，加入３ ｍＬ ０．５ Ｍ ＮａＯＨ．混匀后于５６０ ｎｍ波长比色，记录ＯＤ值。 １．２．４ ＥＴ采用放射免疫法测定 各组给药灌胃体积为０．２ ｍＬ／１０ ｇ，１次／ｄ，连续灌胃６ ｄ后取血，按照试剂盒说明采用放射免疫法测定。 １．２．５ 小鼠扭体次数的观察［３］３０６ 各组给药灌胃体积为０．２ ｍＬ／１０ ｇ，１次／ｄ，连续灌胃６ ｄ，末次给药１ ｈ后，腹腔注射１．１％冰醋酸，注射后５～２０ ｍｉｎ内直接观察动物的扭体次数。 １．２．６ 小鼠腹腔血管通透性的测定［３］３０６ 各组给药灌胃体积为０．２ ｍＬ／１０ ｇ，１次／ｄ，连续灌胃６ ｄ，末次给药１ ｈ后，腹腔注射１．１％冰醋酸，于注射后３０ ｍｉｎ，每鼠尾静脉注射０．５％伊文思蓝生理盐水溶液０．１ ｍＬ／１０ ｇ体质量。２０ ｍｉｎ后脱颈椎处死，轻揉腹部５０次后，剪开腹部皮肤肌肉