分子杂交 已经复性的DNA分子如果两条链来源不同,就叫杂交分子。 核酸的杂交(hybridization ):序列互补的单链RNA和DNA,或DNA和DNA,或RNA和RNA,根据碱基互补的原则,借助氢键相连而形成双链杂交分子的过程。 核酸探针及标记 探针(probe):是一段可以与靶核酸序列特异结合发生相互作用的核酸序列,经过标记后可以用来检测出靶核酸序列。 探针的性质:DNA,RNA,双链或单链均可 探针的长度:从20bp到几kb都可以 探针的标记:同位素或非同位素 DNA双螺旋结构指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。 DNA双螺旋结构的主要特征 DNA是由反向平行的两条脱氧核苷酸长链盘绕而成。 DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧。 两条链上的碱基通过氢键相结合,G与C配对,A与T配对。 DNA双螺旋的表面形成两条凹槽,一条宽而大,称为大沟,另一条小而窄,称为小沟。 大沟和小沟对于调控蛋白识别DNA双螺旋结构的特定信息非常重要。 影响双螺旋结构稳定性的因素 氢键(hydrogen bond) 磷酸酯键(phosphodiester bond) 带负电荷的磷酸基团的静电斥力 碱基堆积力(Base stacking forces) 是主要的稳定因素。 DNA螺旋体是内部由重叠排列的碱基对堆积的一个棒状实体。因为各个碱基堆积在一起
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