冷鲜猪肉中假单胞菌的分离及其鉴定方法要点.docVIP

冷鲜猪肉 课堂报告依据的知识背景 假单胞菌属于细菌的一科，是无核细菌 假单胞菌是假单胞菌科的 1属。专性需氧的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌，呈杆状或略弯。菌体大小(0.5～1)×(1.5～4)微米。具端鞭毛，能运动。有些株产生荧光色素或（和） 红、蓝、黄、绿等水溶性色素，不发酵糖类。大多数菌的适温为30℃。DNA中的G+C克分子含量为58～70%。存在于土壤、淡水、海水中。目前已确认有 29种，其中至少有3种对动物或人类致病。 二、撰写课堂报告的目的 通过撰写课堂报告让学生积极主动思考问题，学习掌握假单胞菌的相关基础知识，明晰冷鲜猪肉中假单胞菌的具体分离技术和鉴定方法，从而拓展学习掌握食品微生物学技术的基本操作原理和方法，同时也能提高学生主动发现问题、思考问题、解决问题的能力。 三、撰写课堂报告的思路 首先通过网上查阅资料和查阅书本资料的方式了解假单胞菌的定义及相关基本知识，在此知识背景下找到冷鲜猪肉中假单胞菌的类型及产生机制，通过所学知识和所找资料在掌握假单胞菌特性的基础上找到其相对应的分离方法和鉴定技术。分析讲解分离方法及鉴定技术的时候，积极主动的提出相关问题，找到这个过程中的注意事项并在课堂上展开讨论，积极思考拓展有关食品微生物学中微生物分离和鉴定的方法。 课堂报告的正文 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。 草酸铵结晶紫染1分钟。 c、自来水冲洗，去掉浮色。 用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。 用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。酒精脱色为整个流程最关键的一步。 用蕃红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。 1.绿脓杆菌细菌显微镜检查 铜绿色假单胞菌，为细长的革兰氏阴性小杆菌，长1.3～3.0m，宽约0.5m，在静置培养下常呈多形性，无孢子，菌体一端有细长鞭毛，运动极为活跃。可产生多种水溶性色素，其中能使脓汁变为绿色的绿脓色素。 2.马鼻疽杆菌分泌物作涂片检查 可发现Gram阴性的马鼻疽杆菌，若用吕氏碱性美蓝着色，菌体呈深浅交替的染色部分。 3.类鼻疽血清学检查 以耐热多糖抗原或类鼻疽菌素作间接血凝试验或补体结合试验，在急性期一周末常出现强阳性，2～5周时90%患者都可出现阳性。 干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法