第六讲：翻译.ppt

翻译 翻译：RNA参与蛋白质生物合成，将核苷酸序列转变为氨基酸序列的过程。 第一节 基本知识 第二节 原核生物的翻译过程 第三节 真核生物的蛋白质翻译过程 第四节 蛋白质生物合成初始产物的后加工 mRNA 遗 传 密 码 遗传密码字典 遗传密码的性质 密码子与反密码子的配对关系 同工tRNA（isoaccepting tRNAs） 携带AA相同而反密码子不同的一组tRNA； 不同的反密码子识别AA的同义密码； 同功tRNA在细胞内合成量上有多和少的差别，分别称为主要tRNA和次要tRNA。 主要tRNA中反密码子识别tRNA中的高频密码子，而次要tRNA中反密码子识别mRNA中的低频密码子。 1）无义抑制（nonsense suppressor） 无义抑制或无义校正：通过抑制tRNA识别无义突变位点，将某种氨基酸插入该位点，使得多肽链继续延伸，而不中途停止。 无义抑制通过三个不同的途径进行： （1）tRNA反义密码子的突变； （2）tRNA其它结构的改变； （3）tRNA反密码子化学修饰。 2） 错义抑制 抑制tRNA识别错义突变位点，通过插入原来的氨基酸或其它的氨基酸而抑制错义突变，从而能完全恢复或部分恢复蛋白质活性 。 两种方式可以形成抑制型tRNA： 1）tRNA反密码子发生突变， 2）tRNA其他的结构变化或是氨酰tRNA合成酶的突变而改变了其荷载氨基酸的变化。 3）抑制突变的特点： 1）不是所有终止密码子的抑制基因都产生有功能的蛋白质，起到抑制或校正的作用，关键是要看氨基酸取代的情况。 2） 校正的作用不可能是完全的，抑制基因的效率很低，通常为1~5%。 核糖体 核糖体的组成 第一节 基本知识 第二节 原核生物的翻译过程 第三节 真核生物的蛋白质翻译过程 第四节 蛋白质生物合成初始产物的后加工 蛋白质生物合成的机制 翻译过程可分为起始、延长、终止三个阶段。 1 起始 组成过程： 30S+50S+mRNA+fMet- tRNAfmet 70S-mRNA-fMet- tRNAfmet+GDP+Pi ☆ IF3－－赋予30S 亚基与mRNA 结合的能力。 （30S亚基没有与mRNA主动结合的能力） ☆ IF3 使30S 亚基不能与50S亚基结合，保证解离状态 ☆ 30S 亚基与mRNA 的结合。 SD（5’-AGGAGG-3’）与16S rRNA的 3’ 端(3’-UCCUCC-5’）,使AUG定位在P位上。 ☆ 30S 复合物中，起始密码子位于P位点，只有fMet-tRNAfMet能进入。 2 延伸 以氨酰－tRNA 进入70S 起始复合物的A位为标志（第一个进位过程）。 2.1 延伸因子(Elongation factor，EF） (1)进位 氨基酰-tRNA与核糖体结合，进入A位的过程。 过程： （2）转肽 a 肽酰转移酶 （peptidyl transferase ） 位于核糖体大亚基，催化肽键生成； b 过程： 肽基转移酶催化，P位tRNA的甲酰甲硫氨基或肽基转移给A位上进入的氨基酰-tRNA，形成肽键连接， 生成的二肽酰-tRNA占据A位， P位的空载 tRNA，将迅速从核糖体脱落。 （3）移位 肽键生成后，核糖体沿mRNA 向前移动一个密码子的距离。 a EF-G有移位酶活性，催化A位二肽酰-tRNA进入P位， 同时核糖体沿mRNA移动一个密码子， A位再次空缺，等待第3个氨基酰-tRNA进位。 b 伴随GTP水解，EF-G释放，等待下一个三元复合物进入。 3 终止 包括：肽链释放， tRNA逐出，核糖体与mRNA解聚。 3.1 终止密码UAA,UGA,UAG； 3.2 释放因子(releasing factor,RF) 核糖体在IF-3作用下，解离出大、小亚基。 解离后的大小亚基又重新参加新肽链合成，循环往复，所以多肽链在核糖体上的合成过程又称核糖体循环。 mRNA翻译的多肽链没有功能，称为新生蛋白质或蛋白质前体，需要经过加工改造才能成为有功能的蛋白质。 mRNA的信息阅读：5’端向3’端， 肽链延伸：从N端到C端。 第一节 基本知识 第二节 原核生物的翻译过程 第三节 真核生物的蛋白质翻译过程 第四节 蛋白质生物合成初始产物的后加工 2 延伸 与 Prok 相似，进位、成肽和移位三个步骤。 两者区别在于延伸因子体系的不同。 3 终止 释放因子eRF, 识别三种终止密码子 UAA、UAG、UGA。 终止机制与Prok相同： 识别终止密码子； 肽基转移酶构象改变，