第五章 体外分析技术精要.ppt

第五章 体外放射分析技术 In Vitro Radioassay 定义与分类 一、定义：体外放射分析技术是利用核射线对体内的各种生物活性物质进行体外定量分析的各种方法。 二、分类： 1、竞争性体外放射分析法（如RIA） 2、非竞争性体外放射分析法（如IRMA） 3、由体外放射分析技术派生出来的非放射性标记免疫分析技术 第一节 放射免疫分析法radioimmunoassay， RIA 1959年，美国的两位科学家Berson和Yalow首次将示踪技术的高度灵敏性和免疫学抗原-抗体结合的高度特异性结合起来，创立了放射免疫分析技术，开创了生物活性物质微量测定技术的新时代。RIA 的特点：灵敏度高、特异性强、准确度高、稳定性好。经不断改进，现在广泛应用于临床检测和科学研究的很多领域。 一、基本原理 放射免疫分析法的基本原理是竞争性抑制，被测量的微量物质Ag（未标记抗原）和标记有放射性核素的该种物质*Ag(标记抗原)对其抗体Ab有相同的结合能力，在反应系统中， Ag和 一定量的*Ag竞争有限量的Ab，反应遵循质量作用定律， 即Ag和 *Ag与Ab结合的量取决于Ag和 *Ag的浓度比例。生成的*AgAb的量随Ag的增加而减少，它们是负相关的关系，即Ag抑制*Ag与Ab的结合，反之*Ag也抑制Ag与Ab的结合。反应达到平衡后，分离*AgAb （B）与*Ag（F），B、F或B/F