12基因工程的操作程序.pptVIP

（海南卷26）（选修模块3：现代生物科技专题） 图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答： （1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_____、____、_____三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行_________。 （2）用上述3种连接产物与任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是____________;接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________。 （3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是____________，其合成的产物是_________。 （4）在上述实验中，了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是____________________。 答案：（1）目的基因-载体连接物 载体-载体连接物 目的基因-目的基因连接物 分离纯化/筛选（其他合理答