2005版药典药品微生物限度检查法.ppt

2005版药典药品微生物限度检查法 概念 微生物限度检查法系指检查非规定灭菌制剂及其原料，辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数，霉菌数及酵母菌数及控制菌检查 环境条件 应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单项流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。洁净区域应定期进行洁净度验证。 培养 温度 细菌为30～35℃ 霉菌及酵母菌 为23～28℃ 控制菌为35～37℃ 检验量 一般供试品的检验量为10g或10ml，化学膜剂为100cm2。贵重药品，微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加10g或10ml。 检验时应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，膜剂还不得少于4片。 供试液的制备 液体供试品 固体、半固体或粘稠性供试品 取供试品10 g（10ml) ，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml,混匀，为1：10供试液， 需用特殊供试液制备方法的供试品 ? 非水溶性供试品 膜剂供试品 肠溶及结肠溶制剂供试品 气雾剂、喷雾剂供试品 非水溶性供试品 取本品10g，置输液瓶中加无菌十四烷酸异丙脂20ml，充分振摇，使供试品溶解。 然后加45℃ pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，充分振摇，将输液瓶倒置，静置使油水明显分层，分别取其水层1ml加入平皿。 微生物检查方法 常规法 培养基稀释法 离心沉淀集菌法 薄膜过滤法 中和法 稀释剂对照组 供试品制备需要分散、乳化、中和、离心或薄膜过滤等特殊处理时，应增加稀释剂对照组，以考察供试液制备过程中微生物受影响的程度。 回收率计算 样品回收率计算公式=((试验组平均菌数-供试液对照组平均数)÷活菌组平均菌数)*100% 表1 菌落计数（cfu/ml） 试验菌 实验次数 试验组 活菌组 供试液对照组 回收率 大肠杆菌 1 54 49 62 60 0 84％ 2 98 87 102 94 0 94％ 3 45 50 55 57 0 88％ 金黄色 1 60 58 67 75 0 83％ 葡萄球菌 2 50 45 58 53 0 86％ 3 71 73 78 73 0 95％ 枯草杆菌 1 49 41 58 55 0 80% 2 38 42 45 52 0 82% 3 74 80 85 88 0 89% 白色念珠菌 1 101 90 103 104 0 92% 2 79 75 81 89 0 91% 3 85 83 95 86 0