番茄叶片基因组DNA快速制备技术及其在基于实时.PDFVIP

HEREDITAS (Beijing) 2011 9 , 33(9): 1017―1022 ISSN 0253-9772 技术与方法 DOI: 10.3724/SP.J.1005.2011.01017 番茄叶片基因组DNA 快速制备技术及其在基于实时 荧光定量PCR 的转基因检测中的应用 王伟伟, 朱长青, 刘小花, 陈昆松, 徐昌杰 , 310058 以番茄(Solanum lycopersicum L. cv. Micro-Tom) 叶片为试材, 建立了一种简便快速制备叶片基因组DNA 的方法。2~20 mm2 的叶片即可满足制备要求, 制备过程只需一种提取试剂、只涉及1 次移液和1 次离心操作, 不 涉及沉淀。确定了所制备的DNA 用于实时荧光定量PCR 的合适用量为0.1~0.2 L (反应总体积为 12.5 L), 发 现过量模板的使用可降低PCR 效率且可导致扩增失败。该项DNA 快速制备及相适应的实时荧光定量PCR 技 术已成功应用于