DNA稀碱快速提取实验毕业论文答辩ppt模板.ppt

目录 研究背景与目的 实验材料 实验方法 结果与分析 DNA质量检测 同一引物不同品种的扩增图谱 不同引物同一品种的扩增图谱 结论与讨论 致谢 结果及分析（3）-RAPD扩增检测 结论及讨论 可行性： 通过实验，该方法能够快速得到DNA，并可以进行RAPD扩增鉴定。表明，糯玉米种子快速提取的方法是可行的。 比较：与以往CTAB法和SDS法相比，具有 ①快速：无需长时间研磨； ②高效：质量好，无降解； ③安全：无需氯仿、β-巯基乙醇等有毒、有刺激性气味的药品； ④廉价：无需液氮研磨。 RAPD分析的优点： 优点：随机引物，容易合成，快速、安全性好、灵敏度高，所需模板DNA量少 Company Logo LOGO 指导教师：XX 糯玉米干种子DNA快速提取及鉴定 班级：XXXXXX 学生：XXXXX 学号：XXXXXXXXXX （版权归本人所有，未经允许，请勿上传） 背景： 1、糯玉米营养价值和保健作用都很高； 2、分子育种是常规育种的重要辅助手段。 目的： 1、DNA的快速有效提取，是分子标记辅助育种的重要前提。 2、本文在前人研究的基础上，以稀碱（0.1mol/L的NaOH溶液）为提取液，快速提取糯玉米基因组DNA，并对其进行了检测。 研究背景与目的 材料与试剂 实验材料： 糯玉米N1、N6、 N7和N8四个品种，由安徽科技学院玉米育种工程中心提供。 主要试剂： ①提取液：0.1mol/L NaOH溶液②电泳缓冲液：5×TBE（Tris-硼酸）③TE缓冲液④琼脂糖⑤无水乙醇（使用冰的沉淀DNA效果较好）⑥75%乙醇 PCR反应试剂：随机引物，dNTP(10mM)，TagDNA聚合酶(5U/μL)，MgCl2(25mM)，10×Buffer 主要仪器： 1.5ml离心管，烧杯，移液器，BIO-RAD凝胶成像系统，高速冷冻离心机，电泳仪、琼脂糖水平电泳槽，电子分析天平，PCR仪，等等。 实验方法 1)取每个品种干种子一粒放入离心管内，捣碎，加入300μL0.1mol/L的NaOH溶液研磨至匀浆； 2)8000r/min转速，离心6分钟； 3)取上清液，加入到事先装有500μL无水冰乙醇的离心管中，上下轻轻颠倒几次，片刻可看到白色絮状物； 4)8000r/min转速离心6分钟； 5)倒去液体，白色沉淀物用75%酒精洗1-2次，倒去酒精； 6)晾干，加入50μL的TE溶液，使其充分溶解。 结果及分析（1）-DNA质量检测 1 2 3 4 图1 糯玉米干种子DNA琼脂糖凝胶电泳图 注：1：品种N1；2：品种N6；3：品种N7；4：品种N8 ?从图1中可以看出，所提取糯玉米基因组DNA质量较好，带型完整清晰，未发生降解现象。但DNA浓度上有所差异，在四个品种中N6的DNA浓度较低。 结果及分析（2）-RAPD扩增检测 1 2 3 4 图2 同一引物（引物6 ）不同品种RAPD扩增的电泳图谱 注：1: 品种N1；2:品种N6；3: 品种N7；4: 品种N8 ?从图2中可以看出引物6在四个样品中均能扩增出大小不同的若干个带型，表明用稀碱法提取四个糯玉米品种的DNA，可以应用在RAPD分子标记中。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 ?从图3中可以看出，在品种N1提取的DNA溶液中，引物8、25、43、57、85和92六个引物能够扩增出大小不同的带型；而引物42、59、73三引物在品种N1中没有扩增出带型；表明引物42、59、73品种在N1中没有特异性。 图3 同一品种（N1）不同引物RAPD扩增电泳图谱 注：1: 引物8； 2: 引物25；3: 引物42；4: 引物43； 5: 引物:57；6: 引物59；7: 引物73；8: 引物85；9：引物92 大学本科的学习生活即将结束。在此，我要感谢所有曾经教导过我的老师和关心过我的同学，他们在我成长过程中给予了我很大的帮助。本文能够顺利完成，要特别感谢我的导师a老师和b老师，感谢系里各位老师的关心和帮助。 最后向所有关心和帮助过我的人表示真心的感谢。 致谢 Company Logo LOGO