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改性PE膜的生物可降解性研究 班级：高082 姓名：潘冬俊 学号:0808062049 PE改性的意义 液体培养实验 固体琼脂培养实验 菌种鉴定 改性PE膜降解性失重检测 改性PE膜的红外光谱测试 * 改性PE膜的生物可降解性研究 PE改性的意义 实验部分 实验结论 　随着塑料产量的迅速增长,废弃塑料的后处理及造成的环境污染越来越受到各国的关注,塑料垃圾造成的环境污染已成为全球性的问题。塑料由于其稳定性好,长期填埋在地下,也不易腐烂分解,实质上成为长期埋存地下的垃圾,这不仅没有解决污染源的问题,还浪费了大量的塑料废弃物中有价值的原料资源和能源,因此用填埋法处理已受到限制。而焚烧处理,设施需要投入大量资金,且焚烧又会产生高的热量,损伤焚烧炉以及释放有害气体而难于处理,严重污染环境。 由此可见,研究开发低成本的多功能、全降解聚乙烯(PE)地膜,并实现产业化,是农业可持续发展、根治白色污染的迫切需要;同时研究、制定配套的产业政策,从政策层面上保证降解地膜的推广应用,无疑具有重要意义。 1 原料 菌株的分离 2 3 改性PE膜的微生物降解试验 降解菌的分离与纯化 4 5 改性PE膜降解性失重检测 6 改性PE膜的红外光谱测试 实验 部分 基础无碳源(琼脂)培养基: K2HPO40·7 g,KH2PO40·7 g, MgSO4·7 H2O 0·7 g, NH4NO31·0 g,NaCl0·005 g, FeSO4·7H2O 0·002 g, ZnSO4·7H2O 0·002 g, MnSO4·H2O 0·001 g,琼脂粉20 g,蒸馏水 1 000 mL, pH 7·0~7·2。 本实验采用两种培养基,基础无碳源培养基是为检测PE地膜 的生物降解性而设计的,主要考察微生物在以实验PE地膜为 唯一碳源的条件下生长的状况,从而判断材料的生物可降解 性;察氏(Czapek)培养基则是分离筛选真菌的常规培养基。 PE膜:不添加降解助剂直接以PE为原料,在常规吹 膜机组上吹制而成,山东科技大学高分子化学实验 室。 改性PE膜:用降解助剂与聚乙烯以一定的 配比混合均匀后,在常规吹膜机组上吹制 而成,山东科技大学高分子化学实验室。 原料 菌株的分离 为了从土壤中分离筛选对改性PE有潜在降解能力的菌株,分别在农田土壤里、生活垃圾堆肥中、黄岛泥布湾污水处理厂的污泥中取样。 样品采集后保存于低温冰箱中,尽量减少其中菌相的变化。 配制察氏培养基划线分离, 28℃培养7 d。分离出单菌后编号, 4℃冰箱保藏。 A C B 液体培养 实验 固体琼脂 培养实验 菌种 鉴定 改性PE膜的微生物降 解试验 将改性PE膜剪成3 cm×4 cm长方形,消毒,干燥待用。配制基础无碳源液体培养基灭菌。将分离得到的霉菌孢子分别制成108个/mL的单菌孢子悬浮液,按1/100分别接种,加入三片改性PE膜。28℃摇床中振荡培养30 d,提供一定的光照。检测菌种能否利用改性PE膜为唯一碳源进行生长繁殖。相同条件下以PE膜对照。 将改性PE膜剪成3 cm×4 cm长方形,消毒,干燥。将分离得到的霉菌分别制成108个/mL的单菌孢子悬浮液。 配制基础无碳源固体培养基灭菌。 培养基平铺于培养皿中厚约10 mm,然后将改性PE膜平铺于培养基上,分别涂布1 mL单菌孢子悬浮液。提供一定的光照和湿度, 28℃温箱内培养30 d。 观察菌种能否附着于改性PE膜上,并利用其为唯一碳源进行生长繁殖。 比较培养前后膜质量损失。 同等条件下,以PE膜做对照实验 在培养试验的基础上,挑取能够在改性PE膜上生长的微生物进行菌种初步鉴定。菌落观察:配制察氏培养基,灭菌制成平板。将真菌点种于培养基上, 28℃培养5 d。观察菌落的大小、形状、颜色、质地及渗出物特点。 菌丝体和孢子形态观察:挑取真菌的菌丝体,置于滴有乳酸石炭酸液的载玻片上,加盖盖玻片,制作临时装片,在高倍镜下观察菌丝分隔情况和分生孢子着生情况(辨认分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子。 固体培养法检验试验中,发现编号为M6的真菌有大量附着于改性PE膜上生长(见图1),而对照PE膜没有M6菌附着;其他菌株没有发现生长现象。 在培养试验的基础上,挑取能够在改性PE膜上生长的微生物进行菌种初步鉴定。菌落观察:配制察氏培养基,灭菌制成平板。将真菌点种于培养基上, 28℃培养5 d。观察菌落的大小、形状、颜色、质地及渗出物特点。 菌丝体和孢子形态观察:挑取真菌的菌丝体,置于滴有乳酸石炭酸液的载玻片上,加盖盖玻片,制作临时装片,在高倍镜下观察菌丝分隔情况和分生孢子着生情况(辨认分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子。 固体培养法检验试验中,发现编号为M6的真菌有大量附着于