超声波辅助处理农杆菌介导大豆胚尖转化转基因植株的获得和分子鉴定.pdf

33 6 大 豆 科 学 Vol． 33 No． 6 第 卷 第 期 2014 年 12 月 SOYBEAN SCIENCE Dec． 2014 超声波辅助处理农杆菌介导大豆胚尖转化转基因植株的获得和分子 鉴定 1 1，2 1，2 ， ， 孙式静 素欣 献忠 杨 冯 (1． 山东省高校系统生物学 / ， 250014 ;2． / 重点实验室 山东师范大学生命科学学院 山东济南 中国科学院东北地理与农业生态研究所 中国科 ， 130102) 学院大豆分子设计育种重点实验室 吉林长春 : Williams 82 ， ， 摘 要 以大豆 成熟胚尖为试验材料 建立了超声波辅助处理的大豆胚尖农杆菌转化体系 研究了不同超 UidA (GUS) 。 : 声波处理时间对报告基因 瞬间表达的影响和不同草铵膦浓度对大豆转化效率的影响 结果表明 在超声 2 min ， GUS ; 0． 3 ～ 0． 6 mg ·L － 1 ， 波处理 时 报告基因 的瞬时表达效率达到最高 在 草铵膦梯度筛选浓度下 阳性转基因 。 PCＲ Basta ; PCＲ 植株的数量最多 对于所获得的转基因株系进行了 检测和除草剂 涂抹抗性检测 实时荧光定量 检测 显示转基因植株的目的基因的表达量达到野生型的1． 7 ～ 42 倍，Southern 杂交检测表明外源基因已经整合到大豆基 因组中。 : ; ; ; 关键词 大豆 胚尖 农杆菌转化 超声波辅助处理 10． 11861 /j． issn． 1000-9841． 2014． 06． 0808 中图分类号:S565． 1 文献标识码:A DOI : Molecular Characterization of the Transgenic Soybean Plants by Sonication-as- sisted Agrobacterium -mediated Transformation Using the Embryonic Tips 1 1，2 1，2 SUN Shi-jing ，YANG Su-xin ，FENG Xian-zhong (1． College of Life Science，Shandong Normal University /Key Laboratory of Systems Biology in Universities of Shandong ，Jinan 250014