生物蛋白胶外支架预防移植静脉早期损伤的实验研究.docVIP

　　生物蛋白胶外支架预防移植静脉早期损伤的实验研究 作者：万力,江鹏飞,高涛,万于华,刘季春 【摘要】 目的 以生物蛋白胶作为外周支持， 研究 其对兔移植静脉的 影响 ，从而寻找更适合临床的外支架材料。 方法 24只雄性新西兰大耳白兔随机分为非支架组（NS组 n＝12）和生物蛋白胶支架组（FS组 n＝12）。建立兔颈外静脉颈总动脉旁路移植术模型。FS组给予生物蛋白胶作为外支架。术后28天取出移植静脉，进行超微结构、组织病理 分析 和免疫组织化学分析。结果 超微结构显示与NS组相比，FS组移植静脉损伤程度明显减轻。免疫组化结果显示与NS组相比，FS组移植静脉细胞增殖核抗原表达明显受到抑制；NS组内皮层损伤严重，有淋巴细胞侵润，而FS组内皮层则几乎完好无损（Plt;0.01）；在NS组平滑肌细胞增殖活跃且向内膜迁移，FS组平滑肌细胞增殖受到抑制，且向外膜迁移；在FS组移植静脉外膜有丰富的成熟微小血管网形成，但是在NS组，微小血管数量则非常少。结论 生物蛋白胶外支架能给兔移植静脉提供足够的外周支持，明显缓解移植静脉植入动脉循环后的早期损伤。该作用与保护血管内皮完整、抑制增殖细胞核抗原表达、促使平滑肌细胞向外膜迁移和形成外膜新生血管网有关。 【关键词】 生物蛋白胶;外支架;移植静脉;增殖细胞核抗原 Fibrin Glue as External Support Prevents VEin Graft Early Injury Abstract: OBJECTIVE To investigate the effect of fibrin glue on preventing vEIn graft failure as perivenous application and explore a novel alternative external support. METHODS 24 Neale rabbits als underon carotid artery interposition grafting and then fibrin glue ples of tissues munohistochemical analysis icrostructure onstrated a statistically decrease in neointimal and medial hyperplasia pared munohistochemical analysis shoost intact endothelium damages phocytes infiltrated. In NS grafts, the smooth muscle cells igrated to intimal, ooth muscle cells igrated to adventitia. C and formation of numerous microvessels. Key g/kg）诱导，肌肉注射2%戊巴比妥（30mg/kg）维持麻醉，200 U/kg肝素静脉达到半肝素化。颈部正中切口，截取2.0 cm颈外静脉，修剪静脉段两端，将其倒转，两端分别与颈总动脉断端用8-0无创缝线行间断外翻端－端吻合。吻合完毕后将远心端无创血管夹开放，回血使静脉桥充盈至 自然 状态，此时支架组给予生物蛋白胶（约0.8 ml）于静脉桥外周均匀喷洒，15　min后待蛋白胶凝结， 于术后第28天取材。 1.3 检测指标和结果判断 将标本分为两部分，分别置于3.8%戊二醛溶液中和中性4％多聚甲醛中固定，行超微结构观察和组织病理和免疫组化观察。①内膜评分在光镜下观察内膜内皮细胞染色表达情况。根据内膜缺失所占整个内膜的百分率评分［6］，评分如下：0分，内皮完整、无缺失；1分，内膜缺失率lt;10%；2分，内膜缺失率10%～25%；3分，内膜缺失率25%～50%；4分，内膜缺失率gt;50%；②PA指数：PA定位于细胞核内，呈细颗粒状棕黄色沉淀。×400光镜下，计数单位视野阳性细胞数占总细胞数百分比，每例切片随机10个400倍视野中的PA平均数即为PA指数。 1.4 统计学分析 实验数据使用SPSS 10.0软件包进行统计学分析，所有数据以均数±标准差(±s)表示。组间比较采用t检验。内膜评分比较采用卡方检验。P＜0.05为差别有显著意义，P＜0.01为差别有高度显著性意义。 2 结 果 2.1 一般情况 实验过程中无实验动物死亡。吻合口完成时各吻合口均通畅。术后第28天NS组有3例静脉桥阻塞，而FS组静脉桥均通畅。NS组静脉桥外观膨胀明显，而FS组静脉桥仅轻微膨胀，此时生物蛋白胶在移植物外周仍清晰可见。 2.2 移植静脉的组织病 理学 形态变化 NS组血管