用于再灌注损伤研究的两种肝移植模型的筛选.docVIP

　　用于再灌注损伤研究的两种肝移植模型的筛选 【摘要】 目的：筛选一种用于研究肝移植过程中缺血再灌注损伤的大鼠肝移植模型。方法：将SD大鼠随机分为假手术组(S组)、原位肝移植组(OLT组)与自体肝移植组(AT组)。比较各组大鼠手术时间、存活率及术后24 h血清中总胆红素(TB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，观察肝组织形态学改变。结果：与S组相比OLT组、AT组术后血清TB、ALT、AST升高明显，AT组较OLT组术后存活率明显提高，血清TB、ALT、AST及TNF-α含量明显降低，肝形态异常变化减轻(Plt;0.05)。结论：自体肝移植模型手术简单、成功率高、可比性强，且排除了免疫损伤的影响，更好地反映了肝脏缺血再灌注损伤的病理生理过程，比较适宜作为肝移植缺血再灌注损伤研究的动物模型。 【关键词】 肝移植·再灌注损伤·大鼠 　　【ABSTRACT】 Objective: To select a more suitable liver transplantation model for studying ischemic reperfusion injury. Methods: SD rats ly divided into three groups: sham operation group (S), orthotopic liver transplantation group (OLT) and analogic liver transplantation group (AT). The requirement for micro-surgical skills, survival rate and deterioration of histomorphology after operation among each group e time , the levels of total bilirubin (TB), alanine aminotransferase(ALT), glutamic oxalacetic transaminase(AST) and tumor necrosis factor-α(TNF-α) in the serum at 24 hours after operation ilder and the levels of TB, ALT,AST,TNF-αicro-surgical skills and had higher survival rate(Plt;0.05). Conclusions: AT simplifies the procedure of OLT. It really reflects the pathophysiologic course of ischemic reperfusion injury, therefore it can be chosen as an ideal model for studying ischemic reperfusion injury in liver transplantation. 　　【KEY -2000EX型透射电镜(日本，Olympus)，PM10SP型光学显微镜(日本，Olympus)，MiVnt显微图象分析系统(上海，光学仪器厂)，SP-2102UV型紫外可见分光光度计(上海，光谱仪器有限公司)，FA1004N型 电子 天平(上海，精密仪器仪表有限公司)，动物实验手术台及显微外科手术器械购于上海医疗器械有限公司手术器械厂。 　　1.3　实验方法 　　1.3.1　分组　SD大鼠随机分为3组，各组有效例数50例。1)假手术组(S组)：进腹后游离肝周围韧带，解剖分离第一肝门，游离下腔静脉(IVC)，不夹闭任何血管亦不灌注;2) 原位肝移植组(OLT组)：采用“双袖套法”建立大鼠异体肝移植模型;3)自体肝移植组(AT组)：根据熊力等[3]的方法制作自体肝移植模型。 　　1.3.2　检测指标　3组大鼠各8只用于术后24 h取材，其余留作存活率观察。检测指标：1) 血清中总胆红素(TB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)，下腔静脉取血2 mL，扬州大学第二临床医学院检验科血生化室AV800全自动生化分析仪检测。2) 血清肿瘤坏死因子(TNF-α)含量用 ELISA法测定。3)肝组织形态学检测：电子显微镜观测由扬州大学检测中心协助完成;光学显微镜检查为常规切片，HE染色。检测用肝组织统一取右前叶。 　　光学显微镜观察：每只随机摄取6个×400倍视野;电子显微镜观察：每只随机摄取6个×23 000倍视野。用MiVnt图象分析系统定量分析肝细胞核平均面积、线粒体光