DNA的结构和特点复习.pptVIP

4．将完全含有15N标记的大肠杆菌转移到含有14N的普通培养液中培养，8 h后提取DNA进行分析，得出含15N的DNA占总DNA的比例为1/16，则大肠杆菌的分裂周期是(　　) A．1.6 h　　　 B．3.2 h C．2 h D．4 h 解析：选A。设DNA分子共复制N代，由DNA分子的半保留复制特点应有2/2N＝1/16，解得N＝5，则大肠杆菌分裂周期所需时间为8/5＝1.6 h。 探究DNA复制方式的方法 1．实验方法 探究DNA复制的方式，采用的是同位素示踪技术和离心处理，根据试管中DNA的分布位置确定复制方式。 方法体验 2．实验过程：(见下图) 第一步：将大肠杆菌放在含有15N的培养基中生长，获得实验用的亲代细菌，使亲代的DNA双链都标记上15N(两条链均为重链)，提取DNA进行CsCl梯度离 心，结果只有一条重带。 第二步：将双链均被15N标记的亲代DNA放在含14N的培养基中生长，让其再繁殖一代，取子代的DNA进行CsCl梯度离心，实验结果显示离心管中出现一条中带(一条链含15N，另一条链含14N)。 第三步：将第二步所得到的大肠杆菌放入含14N的培养基中培养，得到子二代，然后提取DNA进行CsCl梯度离心，实验的结果是离心管中有2条带，即一条轻带(两条链都含14N)，另一条为中带。 3．实验预期：离心后应出现3条DNA带。(如上图) (1)重带(密度最大)：15N标记的亲代双链DNA(15N/15N)。 (2)中带(密度居中)：一条链为15N，另一条链为14N标记的子代双链DNA(15N/14N)。 (3)轻带(密度最小)：两条链都为14N标记的子代双链DNA(14N/14N)。 4．实验结果：与预期的相符。(如上图) (1)立即取出提取DNA→离心→全部重带(15N/15N)。 (2)繁殖一代后取出提取DNA→离心→全部中带(14N/15N)。 (3)繁殖两代后取出提取DNA→离心→1/2轻带、1/2中带。实验结论：DNA的复制是以半保留方式进行的。 DNA的复制方式，可以通过设想来进行预测，可能的情况是全保留复制、半保留复制、分散(弥散)复制三种。究竟是哪种复制方式呢？下面设计实验来证明DNA的复制方式。 例 实验步骤： a．在氮源为14N的培养基中生长的大肠杆 菌，其DNA分子均为14N-DNA(对照)。 b．在氮源为15N的培养基中生长的大肠杆 菌，其DNA分子均为15N-DNA(亲代)。 c．将亲代15N大肠杆菌转移到氮源为含14N的培养基中，再连续繁殖两代(Ⅰ和Ⅱ)，用密度梯度离心法分离，不同分子量的DNA分子将分布在试管中的不同位置上。 实验预测： (1)如果与对照(14N/14N)相比，子代Ⅰ能分辨出两条DNA带，一条________带和一条________带，则可以排除________。 (2)如果子代Ⅰ只有一条中密度带，则可以排除________，但不能肯定是________。 (3)如果子代Ⅰ只有一条中密度带，再继续做子代ⅡDNA密度鉴定：若子代Ⅱ可以分出________和________，则 可以排除分散复制，同时肯定半保留复 制；如果子代Ⅱ不能分出________密度两条带，则排除________，同时确定为________。 【解析】　从题目中的图示可知，深色为亲代DNA的脱氧核苷酸链(母链)，浅色为新形成的子代DNA的脱氧核苷酸链(子链)。因此全保留复制后得到的两个DNA分子，一个是原来的两条母链重新形成的亲代DNA分子，一个是两条子链形成的子代DNA分子； 半保留复制后得到的每个子代DNA分子的一条链为母链，一条链为子链；分散复制后得到的每个子代DNA分子的单链都是由母链片段和子链片段间隔连接而成的。 【答案】　(1)轻(14N/14N)　重(15N/15N)　半保留复制和分散复制　(2)全保留复制　半保留复制或分散复制 (3)一条中密度带　一条轻密度带　中、轻　半保留复制　分散复制 几种酶的作用部位易于混淆 如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是(　　) 易错警示 例1 A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶 【解析】　①作用于氢键，为解旋酶；②、③作用于磷酸二酯键，由图知，②作用于切割时，③作用于缝合时，故②为限制酶，③为DNA连接酶。 【答案】　C 纠错笔记 易混淆的几种酶 项目 种类　 作用底物 作用部位 作用结果 限制酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成黏性末端或平末端 DNA连接酶 DNA分子片段 磷酸二酯键 形成重组DNA分子 项目 种类　 作用底物 作用部位 作用结果 DNA聚合酶 脱氧核苷酸