紫萍提取物对过氧化氢诱导内皮细胞氧化损伤的保护作用研究.docVIP

　　紫萍提取物对过氧化氢诱导内皮细胞氧化损伤的保护作用研究 【摘要】 目的研究紫萍提取物是否具有保护内皮细胞免受过氧化氢损伤的作用。方法采用MTT比色法筛选紫萍提取物作用于内皮细胞的安全剂量，建立H2O2对内皮细胞的氧化损伤模型，并研究紫萍提取物的保护作用。最后采用检测试剂盒方法分析紫萍提取物作用后内皮细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性变化。结果紫萍提取物的浓度lt;100 μg/ml，作用时间为24 h时，无明显细胞毒性。以1 mmol/L的H2O2作用于ECV-304细胞1 h造氧化损伤模型，10，25，50 μg/ml的紫萍提取物具有预防氧化损伤作用，可使细胞的存活率由21.98%分别上升至37.49%，51.71%和64.74%，其机理可能是紫萍提取物能够剂量依赖性的增强SOD，CAT和GSH-Px等酶的活性。但是紫萍提取物无 治疗 氧化损伤的作用。结论紫萍提取物可以有效保护内皮细胞免受氧化损伤。 【关键词】 紫萍 氧化损伤 过氧化氢 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 谷胱甘肽过氧化物酶 Abstract：ObjectiveTo study the protective effect of Spirodela polyrrhiza(L.) SchlEid extract (SE) against the damage caused by hydrogen peroxide (H2O2) in human vascular endothelial cells (ECV-304). MethodsNormal ECV-304 cells for 24h-96h, or H2O2 0.125～10 mmol/L for 1～24 h, the survival rate of cells ined by tetrazolium assay (MTT). To evaluate the protective effect of SE on ECV-304 injury induced by H2O2, ECV-304 odel, and SE treatment groups. In SE treatment group, ECV-304 l for 24 h，before or after H2O2 1mmol/L (final concentration) odel group and the SE treatment group for 1 h. The survival conditions of ECV-304 ore, the activities of SOD, CAT and GSH-Px in ECV-304 cells treated l SE ined by the corresponding assay kits. Results5，10，25，50 μg/ml SE had no significant cytotoxicity on ECV-304 at 24 h，but 100 μg/ml , 200 μg/ml ,and 400μg/ml SE markedly decreased the survival rate at 24 h. The viability of ECV-304 mol/L H2O2 at 1h. Pretreated l SE, the survival rate and the activities of SOD, CAT and GSH-Px in cells anner. But SE had no protection on ECV-304 injury induced by H2O2. ConclusionSE has dual effects on the survival rate of ECV-304 in vitro, ent l SE can protect ECV-304 against H2O2 injury. Key 的微孔过滤器过滤。 RPMI-1640培养基、胎牛血清购自GIBCO公司；SOD，GSH-Px，CAT测定试剂盒均购自南京建成生物研究所；MTT购自Sigma公司。 2 方法 2.1 ECV-304的培养ECV-304培养于含10%的胎牛血清的RPMI-1640培养液中，置于37℃的细胞培养箱中（5% CO2），待细胞铺满培养瓶80%～90%左右时，用0.25%胰酶＋0.02%EDTA的消化液进行传代培养。 2.2 四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法MTT溶解于PBS中，配成5 mg/ml的溶液，0.22 μm的微孔滤膜过滤后避光保存，于一周内用完