细胞生物学与医学的关系综述.pdf

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中 国 医 药 指 南 2011 年 3 月第 9 卷 第 9 期 • 文献综述 • 197 HIV-l M群和O群以及HIV-2抗体。该方法可以用血清、血浆或尿液检 测针对不同抗原成分的抗体,所以其敏感度一般不低于筛查试验,特 测,检测时间为5min,阳性结果一般在2min左右出现,弱阳性结果 异度也很高。就HIV 的病原诊断而言,是目前使用最多的HIV抗体确 5min左右出现;该方法适合基层医院快速筛查,对不同基因型的区别 认试验方法。但是,尽管病毒经过浓缩和纯化,但条膜上仍然可能含 有助于流行病学调查。 有病毒赖以生存的宿主细胞成分,可出现非特异性反应,大多出现在 1.4 凝集试验 中分子量区域。因而,这种方法的缺点是在某些情况下,产生大量的 凝集试验将明胶颗粒、乳胶颗粒或自身红细胞等作为固相载体, 不确定结果。 通过被HIV抗原致敏的固相载体与抗体发生免疫反应,根据固相载体 2.2 线性免疫试验(LIA ) 在孔中的凝集情况,来检测标本中的HIV-1/2抗体。凝集试验操作时 该方法将HIV 不同型别和亚型的特异性抗原(重组蛋白和合成 不需要仪器设备,操作人员不需要很强的实验操作能力和结果解释能 肽)以及质量控制带包被在一条尼龙膜条上,用于检测样本中的 力。但是,由于每次操作需要U板、样品、致敏和末致敏颗粒,需设 HIV-1和/或HIV-2抗体。在检测抗体的同时,还可以区分是HIV-1感染 立阳性对照,需要按要求稀释,孵育时间长达2h等原因,目前尚不能 还是HIV-2感染。LIA可以减少WB 出现的大量不确定结果。 再基层医疗单位得到广泛应用。 2.3 免疫荧光试验 另外,唾液、尿液等生物材料也可以用于HIV抗体的检测。如 该方法以固定在玻片上的感染细胞内的HIV为抗原,与待测血清 艾滋病唾液检测卡,在硝酸纤维素膜上包被人工合成的HIVgp41/ 反应后,加入荧光素标记的抗人免疫球蛋白,洗掉没有结合的荧光抗 gp36蛋白抗原,可同时检测含在唾液中的HIV-1/2抗体,原理为酶 体,在荧光显微镜下观察结果,胞浆内出现特异性荧光而对照孔没有 免疫间接法。主要检测HIV IgA 和IgG ,敏感度和特异度与ELISA 出现,可判定为HIV抗体阳性。但该试验不宜在一般的实验室开展和 相似,避免了静脉穿刺;但样品预处理时间长,且售价较高。尿液 应用。 HIV-1抗体检测试剂在1996年由美国FDA首次批准,主要用于静脉注 HIV抗体检测工作应该按照《全国艾滋病检测技术规范》的要 射毒品人群和其他高危险人群的大规模流行病学调查。如我国赵立 求,在合格的实验室内进行,要采取严格的质量保证、质量控制和质 庆等[1]研究表明,CalypteTM尿液试剂盒的真阳性率为100%,真阴 量评价措施,注意实验室生物安全管理和防护,注意职业暴露的预 性率为99.1% ;与确认试验结果比较,阳性符合率为100%,可以作 防,严格遵守实验室标准操作程序,防止样品间交叉污染,切实保证 为快速筛查的方法。 样品检测质量。 2 确认试验方法 我们坚信,随着检验技术的快速发展,将有更多的试剂和新方法 确认试验包括免疫印迹试验(WB )、线性免疫试验和免疫荧光 用于HIV抗体检测,使HIV感染者得以早期诊断。 试验等方法,其中WB为最常用的方法(金标准)。 参考文献 2.1 免疫印迹试验(WB ) [1] 赵立庆,雷素萍,李连学等.ELISA法检测尿液中HIV-1抗体的研 该方法通过对HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化,能够检 究分析[J].中国艾滋病性病,2003,9(5): 276-277. 细胞生物学与医学

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