肝癌组织细胞骨架连接蛋白和焦点黏附激酶的表达及其意义.docVIP

　　肝癌组织细胞骨架连接蛋白和焦点黏附激酶的表达及其意义 【摘要】 目的： 检测细胞骨架连接蛋白（membrane cytoskeleton cross linker protEin，Ezrin）、焦点黏附激酶（focal adhesion kinase，FAK）在肝癌组织中的表达及其临床意义。 方法 ： 手术切除肝癌标本79例（其中62例附癌旁正常组织）， 应用 免疫组化检测Ezrin,FAK的表达。结果： 免疫组化染色显示，Ezrin和FAK的表达与肝癌的浸润、转移呈正相关,与分化程度呈负相关(Plt;0.05)。结论： Ezrin,FAK的高表达与肝细胞癌的侵袭转移关系密切，它们可能是 影响 肝癌患者预后以及癌细胞转移的重要因素。 【关键词】 肝细胞癌； 细胞骨架连接蛋白； 焦点黏附激酶； 免疫组织化学 　　［Abstract］ Objective: To investigate the expression of Ezrin and FAK in hepatocellular carcinoma,as munohistochemical technique a and 62 cases of adjacent hepatic tissue. Results： Ezrin and FAK over-expression etastasis and ay contribute to carcinogenesis and progression of hepatocellular carcinoma. 　　［Key a； membrane cytoskeleton cross linker protEIn； focal adhesion kinase； immunohistochemistry 　　肿瘤的侵袭转移是一个复杂的病变过程,涉及多个基因的改变。细胞骨架连接蛋白（membrane cytoskeleton cross linker protein，Ezrin）是ERM(Ezrin，radixin，moesin) 家族成员之一, 通过连接细胞骨架和细胞膜, 对细胞黏附、形态、分化、运动等起重要调节作用。近年来其对肿瘤细胞黏附分子的调节在肿瘤的浸润生长和转移中的作用逐渐被重视［1,2］。焦点黏附激酶(focal adhesion kinase，FAK)是一种胞内非受体型酪氨酸蛋白激酶,在整合素介导的信号转导途径中起着关键作用，并与细胞的迁移、侵袭、存活等行为密切相关［3,4］。本 研究 用免疫组化方法检测人肝癌标本Ezrin，FAK表达，观察两者对肿瘤细胞的分化和黏附的影响以及探讨其对肝癌浸润转移的作用。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料来源 　　收集江苏大学附属 医院 2000年1月～2007年1月病理诊断为肝癌的手术切除标本79例，男53例，女26例，年龄43～73岁。所有病例术前均未行放、化疗，其中62例附癌旁组织。 　　1.2 主要试剂 　　Ezrin单克隆抗体购自福建迈新生物技术开发公司（即用型）；FAK抗体(兔抗小鼠多克隆抗体)和生物素标记的羊抗兔IgG购自Santa Cruz公司；ABC试剂购自美国Vector公司。 　　1.3 标本及切片 　　10%甲醛固定，石蜡包埋。每例组织蜡块4 μm连续切片10张,其中1张HE染色作光镜下诊断复查,3张作Ezrin,FAK免疫组化染色，其余备用。 　　1.4 免疫组化判断标准 　　FAK以肝细胞胞质中呈棕黄色着色为阳性细胞，Ezrin在胞质内呈棕色颗粒。按染色强度和阳性表达细胞数， 参考 Mathe.　3 讨论 　　肿瘤的发生 发展 是一个多因素、多步骤、分阶段的过程, 是多种基因作用的结果。肿瘤细胞与细胞外基质的相互作用和肿瘤细胞的浸润转移密切相关。 研究 发现Ezrin编码基因转入低转移能力的细胞系,原不会转移的肿瘤细胞转移能力大大提高,很容易形成肺转移灶;抑制其表达并阻断其功能后,发现高转移的细胞系转移能力明显降低。Ezrin是一种细胞骨架蛋白,活化Ezrin的C端与肌动蛋白细胞骨架连接，N端与多种跨膜分子结合,如CD44，ICAM-1，Ecadherin等。Ezrin参与细胞形态改变、细胞膜结构组建及细胞运动、黏附、相关信号传导,在肿瘤细胞运动、黏附、侵袭中发挥重要作用,其参与多种不同来源肿瘤转移的事实,已通过大量实验得以证实［6-9］。本实验采用免疫组化法检测Ezrin，FAK在肝癌与对应的癌旁组织的表达,结果表明：Ezrin表达与细胞分化、淋巴结转移密切相关，低分化和有转移者，Ezrin表达阳性率显著高于高分化和无转移者；癌组织的Ezrin阳性率明显高于癌旁组织。Ezrin的过度表达可能参与恶性肿瘤转移的诸多过