BiospinTotalRNAExtractionKit.PDFVIP

常见问题及对策 1. 试剂盒（除DNase I外）室温保存，买到试剂盒后，请及时将DNase I保存于 -20 ℃，保质期18个月。 2. 离心速度除已说明外均为12,000rpm，室温离心（有条件可4℃离心）。 3. RNA 在提取过程中可能会受到各种氧化作用的干扰，从而导致RNA提取得率下 降或不稳定，特别是在氧化酶含量丰富的样本中尤为明显。在 RLysis Buffer 中添加 β-巯基乙醇可有效抑制这些干扰，添加比例为 20μlβ-Me/ml Rlysis Buffer，加入β-巯基乙醇后的RLysis Buffer应保存于4℃。 Biospin Total RNA Extraction Kit 4. DNase I 反应是在结合膜上进行，应特特别注意避免 RNA 酶的污染。DNase Buffer 、 MnCl2 与 DNase I 混合后不用低温再次保存，以免使用时温度过低而 造成消化不充分。 5. 首次使用时在DNase Stop Buffer 和Wash Buffer 瓶中加入标签标明量的无污 染的无水乙醇，拧紧瓶盖，并混合均匀。 6. 在使用前请先按照瓶身标签标明体积加入无水乙醇，并将其混匀。 7. 避免环境中RNA 酶污染，操作要戴手套，所有枪头和eppendorf 管以DEPC 水 Biospin 总 RNA 提取试剂盒 处理，移液枪保证洁净无RNA 酶污染。如果把试剂放在超净台（普通超净台或 专用的桌面PCR 超净台）中操作，可以有效减少RNA 酶污染。 8. 提取的总RNA 置于4℃或冰浴中，立即用于下游实验（如RT-PCR）；或立即置 于-80℃冰箱保存。无论采用何种方法提取和保存的RNA，都往往会被很快降解， 因而建议避免提取RNA 后保存。建议先将标本保存在RNA 保存液或液氮中，来 保证RNA 质量不受影响，用试剂盒抽提仍可以获得高质量的RNA。 Cat# BSC63M1