论桂枝茯苓丸对荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡的影响.docVIP

　　论桂枝茯苓丸对荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡的影响 　　 论文 关键词：桂枝茯苓丸；凋亡；SurvivinmRNA 　　论文摘要：目的：探讨桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡机制，为桂枝茯苓丸(GFPUS显微镜(日本)、HITACHI－H500型透射电镜(德国菲利蒲公司)、FACSCALIBUR流式细胞仪(美国BD公司)、SB651旋转蒸发仪(日本RIKAKI公司)、HIMAS－2000多媒体彩色病理图文分析系统(同济医大)。 　　1．2　实验动物　40只昆明小鼠，体重(20±2)g，雄性，由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供。 　　1．3　瘤株S180瘤株，由黑龙江省肿瘤研究所提供 　　1．4　药物　桂枝茯苓丸：按《金匮要略》记载标准，生药均购自齐齐哈尔市中 医院 。桂枝、茯苓、桃仁、牡丹皮、赤芍各药等量，加适量水，浸泡2h，先文火后武火煎煮2次，经过滤除渣后，水浴浓缩，配成1g/mL的水煎剂，置4℃保存备用。 　　环磷酰胺(Cylophosphamide，CY)，山西普德药业有限公司出品，批号 　　1．5　动物模型　取腹腔接种10天的荷瘤小鼠，在无菌条件下抽取腹水(乳白色，黏稠)，放入无菌容器内，置冰块保存。用0.4％台盼蓝生理盐水液计数(计活细胞大于95％)，用生理盐水调细胞浓度至5×106/mL。取KM小鼠30只，每只鼠右侧腋下皮下注射0.2mL瘤细胞悬液。 　　1．6　动物分组及给药方法　将荷瘤鼠随机分为3组，每组10只，分别为模型组、实验组、CY组，另取10只未荷瘤小鼠作为正常对照。模型组(Modelgroup)：生理盐水灌胃0.2mL/(10g·d)；中药组(GFAS－2000多媒体全自动图像分析仪检测，所得数据经SPSS11.0系统处理，采用OneWayANOVA法，两两比较用SNK法。结果用x±s表示。 　　 　　2结　果 　　2．1　抑瘤率　与模型组比较，GFW组、CY组瘤重低于模型组瘤重，差异有统计学意义(P＜0.05)。GFW组与CY组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。GFW组抑瘤率为38.93％。 　　2．2　肿瘤细胞凋亡率　GFAS－2000多媒体图像分析系统对Survivin各组原位杂交反应阳性细胞面密度值、阳性细胞平均灰度值进行分析。与模型组比较，GFRNA表达降低(P＜0.01)，GFRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05)。提示GFRNA量。 　　 　　3　讨　论 　　通过应用各种不同的药物影响信号传导途径，从而触发或重建整个死亡程序，使处于关闭状态的凋亡信号传导各效应环节迅速连通，诱导程序化细胞死亡反应，为肿瘤 治疗 开辟了新思路。细胞凋亡信号传导的大致过程是：细胞整合各种胞内外凋亡信号，通过细胞凋亡信号与其受体形成的复合物经胞浆信号转导蛋白传递至一组细胞凋亡的执行者caspases，再由激活的easpases对其特异性底物进行降解，最终导致细胞凋亡。本实验经流式细胞仪检测表明，GFRNA，结果显示SurvivinmRNA在模型组中高表达，表明在肿瘤细胞中该基因转录功能增强，基因蛋白生成后，通过破坏凋亡平衡参与肿瘤细胞发生 发展 。与模型组比较，GFRNA表达降低(P＜0.01)，表明GFPoNA的转录水平的作用，提示桂枝茯苓丸可通过影响Survivin表达促进肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞生长。 　　综上所述表明GFW具有诱导肿瘤细胞凋亡作用，其分子机制与Survivin表达有关。而肿瘤是多基因异常所致疾病，桂枝茯苓丸抑制肿瘤生长在基因水平的作用是对上述基因特异的作用，或是对多种癌基因和抑癌基因非特异作用有待进一步研究。