MIP-2、MMP-2与TIMP-2在兔棘阿米巴性角膜炎的表达.pdfVIP

引言 棘阿米巴角膜炎（acanthamoeba keratitis，AK ）是由棘阿米巴原虫感染引起 的慢性、进行性角膜溃疡病变，是一种严重的致盲性眼病。1973 年，Nagington[1] 和 Jones[2]报道了首例来自美国南德克萨斯州牧场主的棘阿米巴性角膜炎，此后 的十年仅有十余例的相关报道，但自从上世纪 80 年代中后期开始，AK 患者迅 速增加。经过美国疾病控制中心的统计发现，AK 的发病与角膜创伤，接触污水， 佩戴角膜接触镜有明显相关性[3] 。目前临床上多采用抗炎药物保守治疗该病，缺 乏有效的针对性治疗手段，所以深入研究其发病机制进而干预发病过程中的关键 步骤来达到治疗效果显得十分迫切。 棘阿米巴角膜炎的致病过程主要包括 2 个阶段：第一阶段，致病性的棘阿米 巴滋养体对角膜上皮细胞进行粘附，病变局限角膜上皮层；第二阶段，原虫侵入 基质层，造成广泛的胶原组织损伤，并引起严重的炎症反应。与其他感染性角膜 疾病一样，棘阿米巴性角膜炎的发生也被认为是由病原体和宿主两方面因素共同 作用所致，尤其宿主的炎症反应是十分重要甚至是最重要的原因。而启动炎症反 应的关键因素常常是一些趋化因子和细胞因子。 趋化因子是一组分子量为 8~17kDa 的分泌型蛋白，这些分子通过在病灶及 其周围形成浓度梯度并与不同受体结合后，诱导细胞定向迁徙，从而调控炎症时 组织中白细胞的积聚及其与组织中固定细胞的相互作用。趋化因子及其受体以及 其相关的细胞因子在感染性角膜炎的发病中有着至关重要的作用，一方面这些因 子的适度表达能够发挥抗感染、保护机体和促进组织修复等作用，另一方面过高 [4] 或过低的表达又能破坏组织和加剧感染等 。 巨噬细胞炎性蛋白-2 （MIP-2 ）是趋化因子家族的重要成员之一。MIP-2 主 要的生物学功能是趋化和活化中性粒细胞参与炎症反应，其次 MIP-2 能够刺激 上皮增生，促进损伤的修复，并且还能诱导血管内皮生长因子的合成。在对感染 棘阿米巴原虫的角膜组织的研究中发现：病变区存在大量中性粒细胞。而体外研 究表明，中性粒细胞可以杀伤棘阿米巴滋养体[5] 。中性粒细胞是机体自然免疫的 主要杀伤力量[6] 。MIP-2 作为对中性粒细胞具有特异性趋化作用的细胞因子，它 能够选择性诱导中性粒细胞在病变组织聚集[7]，在棘阿米巴角膜炎的发生和发展 过程中可能起着非常重要的作用。 5 当棘阿米巴侵入角膜基质层后，会造成广泛的胶原组织损伤，并引起严重的 炎症反应，是影响该病预后的关键阶段。所以对这一阶段中关键酶的研究有助于 更加明确 AK 的发病机制。基质金属蛋白酶（MMPs ）就是其中之一。MMPs 属 于锌离子依赖的以细胞外基质成分为分解底物的内肽酶。 MMPs 的主要功能有 [8] ：几乎能降解除多糖以外的全部ECM 成分，使别的 MMPs 激活，形成瀑布效 应，在组织塑性中起着重要的作用。这些功能的发挥有赖于 MMPs 酶原的激活。 当MMPs 以酶原形式存在时，其活性的封闭式由于在其Zn 离子活性中心旁结合 有该 MMPs 前区肽链内所含的一个半胱氨酸，该半胱氨酸阻断了活性中心与底 物的结合所致。一些激活剂可以打断 Cys-Zn 连接，从而使酶活性中心暴露，体 [9] 内存在某些天然激活剂 。但是由于MMPs 表达增多，活性增强，也可能导致多 种疾病的发生和恶化。 在角膜病的发生发展过程中，由角膜细胞分泌的蛋白水解酶百分之九十五以 上是 MMPs[10] 。在生理状态下，角膜上皮细胞和基质中的成纤维细胞均可分泌 MMPs ，但多为无活性的酶原形式[11] 。在炎症发生时，其被活化，参与伤口收缩， 细胞迁移，坏死组织的清除等修复过程，但是当炎症因子大量产生时，如碱性成 纤维细胞生长因子（bFGF ），肿瘤坏死因子（TNF-α），白细胞介素（IL-1 ），血 小板衍化生长因子（PDGF ）等，它们都可上调 MMPs 的表达。过度表达的 MMPs