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2 细胞中多糖的定位要点
* 实验二 细胞中多糖的定性、 定位与（半）定量 过碘酸雪夫反应（PAS）显示糖元和其它多糖物质 * 一、实验原理 过碘酸（ periodic acid）是一种氧化剂，它可把多糖的葡萄糖分子的两个相邻的带有羟基的C-C-键打开，而生成醛基再与染色剂结合。Schiff试剂中的碱性复红（fuchsin basic）是一种混合物，经亚硫酸和二氧化硫的作用，醌式结构的双键被破坏南而消失，已成为无色复红，再经过氧化后的醛基与无色复红液进行结合呈紫红色。 * 二、试剂配制 1. 过碘酸酒精溶液配法 过碘酸（HIO4·2H2O） 0.4克 95%酒精 35毫升 M/5醋酸钠（27.2克+1000毫升H2O） 5毫升 蒸馏水或用0.5-0.1%过磺酸水溶液 10毫升 配制好的溶液保存于冰箱，瓶外加黑纸，溶液显黄色即失效。 2. Schiff氏酒精溶液配法（配后略带红色无妨） Schiff氏原液 11.5毫升 1N盐酸 0.5毫升 纯酒精 23.0毫升 或用Schiff氏原液，配法与Feulgen反应所用相同。 3.采取唾液的方法 刷牙、喇口之后，用1%的醋酸在舌尖部稍稍接触，唾液开始分泌之后，用烧杯盛接之，此唾液经过过滤后即可应用。 4.亚硫酸水（与Feulgen反应所用相同）。 * 三、实验方法 高碘酸-席夫试剂染色法（PAS反应） 1. 把马铃薯块茎用刀片徒手切成薄片。 2. 浸入高碘酸溶液5-15min（EP管） 3. 移入70%乙醇中侵入片刻（10秒）（EP管） 。 4. Shiff试剂染色15min （EP管）. 5. 亚硫酸溶液洗3次，每次1分钟（EP管） 6. 蒸馏水洗片刻（EP管） 7. 装片镜检 碘酒染色法 将马铃薯切片制作好后直接用碘酒染色5分钟，蒸馏水漂洗后置于显微镜下观察。 * 四、实验结果 1. 用高碘酸-席夫试剂染色法处理的马铃薯 细胞内糖元呈紫红颗粒。 经过唾液（37度）或淀粉酶消化者则无糖元的 紫红颗粒。对照片须先用唾液配的0.1-1%淀粉 酶消化30-60分钟后再入染色液。（对照略） 2. 用碘酒染色法处理的马铃薯细胞内糖元 呈蓝色颗粒。 * 五、作业 1. 实验的原理是什么？ 2. 实验组和对照组的细胞壁呈什么颜色？为什么？ 3. 绘图表示土豆细胞中淀粉的分布。
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