第六章_蛋白质.pptVIP

4. 实验注意 1、该方法干扰物质少，如糖、缓冲液、还原剂和络合剂等均不影响显色。仍有强碱性缓冲液、TritonX-100、十二烷基硫酸钠(SDS)、去污剂等干扰该反应。考马斯亮蓝G-250与蛋白质的反应物易附着在比色杯内壁上。 2、蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合的反应十分迅速，在2min左右反应达到平衡；其结合物在室温下1h内保持稳定。因此测定时，不可放置太长时间，否则将使测定结果偏低。 3、该法主要问题是线性关系较差，在蛋白质含量很高时线性偏低。H＋浓度是影响线性关系的主要因素。 * 4、不同来源蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合状况有一定差异。 * (6) —般消化至呈透明后，继续消化30min即可，但对于含有特别难以氨化的氮化合物的样品．如含赖氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸或脯氨酸等时，需适当延长消化时间。有机物如分解完全，消化液呈蓝色或浅绿色，但含铁量多时，呈较深绿色。 注意事项 * 北京福德泰和科技有限公司 产品名称： 凯氏定氮仪 ????????????????????????????????????????????? * 二、双缩脲法 传统的凯氏定氮法应用范围广，灵敏度高、准确，不要大仪器，但费时间，有环境污染。 新开发的：双缩脲法、 紫外分光光度法、 染料结合法、 水杨酸比色法 * 脲（尿素