第十四节 DNA的粗提取.docVIP

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  • 2017-05-14 发布于湖北
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第十四节 DNA的粗提取

   DNA的粗提取与鉴定 主讲:黄冈中学优秀生物教师 王小敏 课题目标: 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理、化学性质; 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 课题重难点: DNA的粗提取和鉴定方法。 一、基础知识 (一)提取DNA的方法 1、提取生物大分子的基本思路   选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2、提取DNA的基本思路   利用DNA与RNA.蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 3、DNA粗提取的原理   (1)DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同。   DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。   DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小;在2mol/L的NaCl溶液中溶解度最大。   (2)DNA不溶于酒精   DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。   (3)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性   ①蛋白酶——水解蛋白质,对DNA没有影响。   ②高温——大多数蛋白质不能忍受60~80℃,而DNA在80℃以上才会变性。   ③洗涤剂——溶解细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。 (二)DNA的鉴定   沸水浴条件下,DNA遇二苯胺被染成蓝色。   原理总结:通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从

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