在有无HPV感染的宫颈癌细胞系中HDAC1的表达变化-第三军医大学学报.doc

在有无HPV感染的宫颈癌细胞系中HDAC1的表达变化 周 鹏，何凤田，刘东擘，黄 刚，龚 薇，许志臻 （第三军医大学基础医学部生物化学及分子生物学教研室，重庆 400038） 摘要: 目的 研究宫颈癌中人类乳头瘤病毒（HPV）感染与组蛋白去乙酰化酶1（histone deacetylase1,HDAC1）表达之间的关系。方法 ①运用RT-PCR和Western blot方法检测3株宫颈癌细胞中HDAC1表达水平。②经脂质体2000介导将含有HPV18E7基因的重组表达质粒瞬时转染人宫颈癌C-33A细胞，运用RT-PCR和Western blot方法检测转染后C-33A细胞中HDAC1的RNA和蛋白水平改变。结果 HDAC1在C-33A细胞中表达最高，CaSki细胞中次之，HeLa细胞中最少。C-33A细胞在转染HPV18E7基因后HDAC1表达降低。结论 HDAC1表达高低可能与HPV是否感染及感染亚型有关，HPV18E7可能直接或间接下调细胞中HDAC1表达降低。 关键词：表观遗传学；宫颈癌；HDAC1；HPV18E7原癌蛋白 The expression difference of HDAC1 on HPV positive and negative cervical cancer lines ZHOU Peng，HE Feng-tian，LIU Dong-bo，HUANG Gang，GONG Wei，XU Zhi-zhen (Department of biochemistry and molecular biology，Third Military Medical University，Chongqing400038，China) Abstract： Object We studied the effect of on HDAC1 expression on cervical cancer lines. Methods HDAC1 mRNA and protein was studied using RT-PCR and Western Blot before and after HPV18E7 transfection. Results HDAC1 expression difference was observed on three cervaical cancer lines. HDAC1 downregulation was also observed through HPV18E7 gene transfaction on C-33 A cell line. Conclusions The results suggest that HPV18E7 expression may be result in HDAC1 downregulation Key words: epigenetic; cervical cancer; HDAC1; HPV18E7 oncoprotein *宫颈癌是女性多发的恶性肿瘤，对女性的健康造成巨大的威胁。临床和流行病学研究提示，90%以上的宫颈癌与人类乳头瘤病毒(HPV)感染有关，尤其是高危亚型HPV16和18。HPV属于空病毒科环状双链DNA病毒[1]，其E6和E7蛋白已被认为是重要的病毒原癌蛋白，参与了多种细胞调控，与细胞转化和肿瘤发生发展有密切关系[2]。但是在感染HPV的病例中只有很少一部分最终发展成宫颈癌[3]，可见HPV感染并不是宫颈癌发生的唯一因素。参与宫颈癌发生的因素很多，其中表观遗传学因素越来越被重视。乙酰化调控是表观遗传学中重要的部分。而近年表观遗传学的研究证明，组蛋白乙酰化水平紊乱在肿瘤发生发展过程中起了非常重要的作用[4]。正常的组蛋白乙酰化水平由组蛋白乙酰化酶(histone acetylases，HATs)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases，HDACs)协调调控。异常水平的HDACs引起的组蛋白乙酰化水平的升高或降低会引起相应基因转录的上调或下降，导致癌症的发生和转移，而HDAC1即是其家族中重要的参与组蛋白去乙酰化修饰的成员。在对乙型肝炎病毒(HBV)导致肝癌的研究中发现，乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)[5]，而宫颈癌中，HPV与HDAC1表达的关系尚未见报道。为了了解不同HPV感染情况下HDAC1表达量变化的情况，我们检测了C-33A(无HPV感染)、CaSki(HPV16感染)和HeLa(HPV18感染)的3株宫颈癌细胞中HDAC1表达的情况，并用含有HPV18E7基因的pEGFP质粒瞬时转染无HPV感染的C-33 A细胞，观察HDAC1表达改变的情况。 1. 材料与方法 1.1 材料 含有HP