21药物的现代分析方法要点.ppt

布洛芬、非那西丁、地巴唑、服他灵、安定、利心平、胃复宁、消炎痛 8种为违禁添加的合成药物 另外 6种药物可疑中间体或分解产物四氯苯甲酸、布洛芬甲酯、3-氯苯酰胺、9-氯氮蒽、双氯酚酸甲酯、2 -2, 6-二氯苯 -氨基 -苯乙酸, 长期摄入 对身体健康无疑是有害无益的 （一） 概述 方法特点： 适用范围广 检测灵敏度高 可提供结构信息 高样品通量 缺点： 第五节 LC-MS 技术与应用 对部分化学成分响应差 对色谱流动相组成有限制 + + 样品与溶剂脱 离及电离 EI ESI APCI LC/MS 接口 离子源 质量分析器 检测离子 HPLC 数据系统 质谱 离子识别 Quadrapole Time of Flight Fourier Transform … + + + + + + + 离子检测 + + - + + + + + + - + + + 作用 将液相洗脱液及样品气化 分离除去大量的洗脱液 使样品分子离子化 （二）接口 API 主要包括 电喷雾电离 ESI 大气压化学电离 APCI 大气压电离技术（API） 1 ESI 接口（电喷雾离子化） 流出液在高电场下形成带电喷雾，在电场力作用下穿过气帘 气帘的作用：雾化；蒸发溶剂；阻止中性溶剂分子 通常只产生分子离子峰，故可用于不稳定的极性化合物 能形成多电荷离子，可用于分析分子量达几十万 u 的化合物 可用于流速 1ml/min ESI 的特点 在 ESI 接口基础上，增加了APCI 蒸发器和电晕放电针 2 APCI 接口（大气压化学离子化） 电极 真空 样品 + 溶剂 雾化气 加热管 反应气 等离子体 Corona放电 APCI电离原理 特点： 一般只给出化合物的分子量信息，通过源内CID（碰撞诱导分解）可同时获得结构信息 适用化合物： 与ESI比较， APCI更适于分析非极性及分子量小 (＜1000 u) 的化合物 （三）质量分析器 将离子按不同质核比 (m/z) 大小分离的分析部件 LC-MS 联用仪中常用质量分析器 四极杆质量分析器 离子阱质量分析器 飞行时间质谱 TOF 1 四极杆质量分析器 + Electron Beam A B C Sample in Ion Beam - 由四根平行圆柱形电极组成，电极分为两组，分别加上直流电压和一定频率的交流电压。样品离子沿电极间轴向进入电场后，在极性相反的电极间振荡，只有质荷比在某个范围的离子才能通过四极杆，到达检测器，其余离子因振幅过大与电极碰撞，放电中和后被抽走。因此，改变电压或频率，可使不同质荷比的离子依次到达检测器，被分离检测。 优点： 结构简单，体积小，重量轻，价格低 扫描速度快，4000 u/s 真空度要求低 (10-4-10-5 Torr)，适与LC相连 定量稳定性好，线性范围宽 缺点： 分辨率较低，质量范围窄 串联四极杆可实现多级MS分析 Capillary Skimmers Octopole Lenses Ion Trap HPLC inlet Nebulizer + + + + + + + + + + + + + + 2 离子阱质量分析器 原理类似于四极分析器，但让离子贮存于井中，改变电极电压，使离子向上、下两端运动，通过底端小孔进入检测器。 由于离子阱可选择性地将某一 m/s 的离子储存一段时间，故又称为时间上的串联质谱 优点： 单一离子阱可实现多级质谱串联 MS n 结构简单，价格低，性/价比高 灵敏度高 质量范围大，达70000 缺点： 谱图与标准谱图有差别 第六节 液相色谱-核磁共振联用技术 NMR对所有含检测核的化合物均有响应，具有极大的通用性。 灵敏度低，要求达到良好的色谱分离 基本操作模式 连续流动操作模式 停流操作模式 峰存储操作模式 与UPLC匹配 的色谱柱比较少 峰面积的重复性欠佳 对高频检测仪器的需要 超高效液相色谱的局限性 尽管UPLC能显著减少复杂样品的分析分离时间，提高检测的灵敏度和分离度，但目前UPLC的使用仍然存在局限性，其普及应用可能仍然需要一些时间。 色谱柱要能够耐受由于粒径减小而带来的高反压，而且粒径的减小也给色谱柱充填技术带来了挑战。 UPLC分析样品时峰面积的重复性略逊于HPLC，特别是低浓度样品时更加明显，其峰面积重复性的RSD约为HPLC的2倍。 UPLC分离样品色谱峰扩展很小，通常峰底宽度只有几秒钟，低