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微小RNA let-7a对CD133+肝癌干细胞增殖和转移的影响.pdf
44. 中华细胞与干细胞杂志(电子版)2015年8月第5卷第3期αin J Cell Stem Cell (EI倒回ic Edition),Aug 2015，而11. 5， No.3
·论著·
微小 RNA let-7a 对 CD133+ 肝癌干细胞增殖和
转移的影响
陈斌沈顺利彭宝岗
[摘要] 目的采用 let-7a 模拟物对CD1331Iuh7 肝癌干细胞进行基因治疗，观察其
对 let-7a 含量和对增殖转移能力的影响，并对其分子生物学机制进行初步探讨。方法流
式分选获得 CD1331I由7 肝癌干细胞，分为 let-7a 组、阴性对照(NC-miRNA) 组、空白对
照组(control) 组。采用 RT-PCR 法比较各组细胞let-7a 的含量，平板克隆形成实验检测 3
组细胞的增殖能力，采用 Transwell 法检测 3 组细胞转移能力，荧光素酶报告基因检测 3
组细胞Wntlß-catenin 信号通路的活性。实验数据3 组比较采用单因素方差分析，两两比
较采用 t 检验。结果流式分选前后Huh7 细胞CDl33 阳性率分别为(1.03 士 0.16) %和
(95.73 :l::1.03) %，差异具有统计学意义(t=22.90， P0.05)0 let-7a 组细胞中 let-7a 的表
达量为对照组的 (2212 土 29) 倍，差异具有统计学意义(t=29.50， P0.05)0 let-7a 组细胞
有效细胞克隆形成数量为(4.6 士1.8) 个/孔，明显低于对照组的 (45.1土 7.0) 个/孔，差异
具有统计学意义(t=-15.64， P0.05)0 let-7a 组transwell 过膜细胞数量37.4 1 土 8.69 明显
少于对照组的 505.90 土 10.24 ，差异具有统计学意义(t= -24.13 , P 0.05)0 let-7a 组Wntl
ß-catenin 信号通路的转录活性较对照组相比明显降低，差异具有统计学意义(P 0.05) 。结
论 microRNA let-7a 模拟物可以通过下调 CD1331Iuh7 肝癌干细胞内 Wntlß-catenin 信号
通路的转录活性实现对肝癌干细胞增殖和转移功能的靶向抑制。
[关键词 1 微刚A; 肝肿瘤: 干细胞: 细胞增殖: 细胞转移
Effect of microRNA let-7a on the proliferation and metastasis of CD133+ liver cancer stem
ceUs Chen Bin, Shen Shunli, Peng Baogang. Depar.阳ent ofHepatic Surgery, the First Affilited
Ho.早iωlofSun Yat甜n University, Guangzhou 510080, China.
Corresponding author: Peng Baogang, Email: pengbaogang@medmai l.
[Abstract 1 Objective To evaluate the proliferation and metastasis of CD133+Huh7
liver cancer stem cells transfected with let-7a mimcs and the underlying molecular mechanisms.
Methods CD1331Iuh7 hepatoma stem cells were isolated by FACS and divided into let-7a
group , negative control group (NC-miRNA) and blank control group (control) group. RT-PCR
was used to compare let-7a levels in each group. The proliferation ability of cells was detected
by plate clone
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