FDA二乙酸荧光素.pdf

·22 · 微 生 物 学 通 报 　　　　　　　　　　　　2006年 33 ( 6) 应用流式细胞术检测毕赤酵母的细胞活性 肖安风 　周祥山　周 　利 　张元兴 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 　上海 　200237) 摘要 : 选取两种细胞活性染色试剂二乙酸荧光素 ( fluorescein diacetate, FDA ) 和碘化丙锭 (p rop idium iodide, P I) , 应用流式细胞术 ( flow cytom etry, FCM ) 检测毕赤酵母细胞活性 。 比较 FDA / P I双染色与 P I单染色的 FCM 图谱 , 后者能够很好地将死活细胞区分开来并得 到正确的比例 。利用 P I单染色检测发酵过程细胞活性的变化 , 甘油补料阶段几乎没有细胞 死亡 , 进入甲醇补料阶段后 , 随着细胞密度的增加 , 细胞的活性不断降低 , 发酵 88 h 时细 胞活性仅为 738% 。 关键词 : 流式细胞术 , 检测 , 毕赤酵母 , 细胞活性 中图分类号 : Q233　　文献标识码 : A 　　文章编号 : (2006) 060022 05 Applica tion of Flow Cytom etry in V iab ility D etection of P ich ia pa stor is Cells X IAO A nFeng　ZHOU X iangShan　ZHOU L i　ZHAN G YuanX ing (S ta te Key L abora tory of B ioreactor Eng ineering, E as t Ch ina Un iversity of S cience and Technology, S hang ha i 200237) Ab stract: Cell viab ility of P ich ia p astoris was detected by flow cytom etry ( FCM ) w ith two reagents fluorescein diacetate ( FDA ) and p rop idium iodide ( P I) Comp ared w ith FDA / P I doub lestained dot p lots and P I single stained dot p lots, the latter cou ld divide dead and living cells into two sep arate zones, and get the correct p ro portion Then P I singlestained m ethod was u sed to detect the change of cell viab ility in P ich ia p a toris ferm enta tion A t glycerol batch and fedbatch p hase, little dead cells were detected A t m ethanol fedbatch p hase, cell viab ility decreased when cell weight increased, and was on ly 738% at 88 h Key words: Flow cytom etry, D etection , P ich ia p astoris, Cell viab ility 毕赤酵母作为一种